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张静中学高考生物专项第十单元三 　现代生物技术 [考纲要求]　1.植物的组织培养。2.PCR技术的基本操作和应用。3.蛋白质的提取和分离。4.实验：DNA的粗提取与鉴定。 考点一　植物组织培养 1．植物组织培养的过程 2．影响植物组织培养的因素 (1)植物激素的浓度可影响细胞分化，但使用的先后顺序及比例不影响组织培养的过程(　×　) (2)pH、温度和光照等也影响植物组织培养(　√　) 易错警示　试管苗培养过程中应注意的问题 (1)培养一株完整的试管苗，必须先进行生芽培养，然后进行生根培养，如果顺序颠倒，先诱导生根，就不好诱导生芽了。 (2)试管苗应该进行见光培养。 (3)试管苗一般在高湿、弱光、恒温下异养生长，出瓶后一定要保温、保湿。 (4)试管苗光合作用能力低，在移栽前给予较强光照闭瓶炼苗，以促进小苗向自养转化。 (5)无菌技术是植物组织培养成功的关键。植物组织培养不同于扦插、压条等常规的无性繁殖。由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，所以对培养条件的要求较高，对无菌操作的要求非常严格。若不小心引起污染，将可能造成培养工作前功尽弃，因此实验过程始终贯穿着灭菌消毒。对培养材料进行表面灭菌时，一方面要考虑药剂的消毒效果；另一方面还要考虑植物材料的耐受能力。不同药剂、不同植物材料，甚至不同器官都要区别对待。 1．(2011·上海卷，22)下列关于植物组织培养的叙述，错误的是(　　) A．外植体可以来自于植物的任何细胞 B．培养应在无菌条件下进行 C．以花粉作为外植体可得到单倍体植株 D．不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同 答案　A 解析　植物组织培养的原理是细胞的全能性，所以作为植物组织培养的细胞必须有完整的细胞核。 1．植物激素与组织培养 (1)生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化 的关键性激素，其作用及特点： ①在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。 ②使用顺序不同，结果不同，具体如下： 使用顺序 实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂，但细胞不分化 先使用细胞分裂素，后使用生长素 细胞既分裂也分化同时使用 分化频率提高 ③用量比例不同，结果也不同 2．影响植物组织培养的因素 (1)材料：植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。一般来说，容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。 (2)营养：常用的培养基是MS培养基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co，有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。 (3)环境条件：pH、温度、光照等条件。如菊花的组织培养所需pH为5.8左右，温度为18～22 ℃，光照条件为每日用日光灯照射12 h。 考点二　DNA的粗提取与鉴定 1．基本原理 2．操作过程 材料的选取：选用DNA含量相对较高的生物组织 　易错警示　(1)本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料，原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。可选用鸡血细胞作材料。 (2)实验中两次使用蒸馏水，第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次的目的是稀释NaCl溶液，使DNA从溶液中析出。 2．下图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序，请分析回答下列问题： (1)步骤一中，向鸡血细胞液中加入____________并搅拌，可使鸡血细胞破裂。 (2)步骤二中，过滤后收集含有DNA的____________。 (3)步骤三、四的操作原理是_______________________________________________ ______________________________________________________________________； 步骤四中，通过向溶液中加入____________调节NaCl溶液的物质的量浓度至____________mol/L时，DNA将会析出，过滤去除溶液中的杂质。 (4)步骤七：向步骤六过滤后的____________中加入等体积的冷却的____________，静置2～3 min，溶液中会出现________色丝状物，这就是粗提取的DNA。 (5)步骤七：DNA遇____________试剂，沸水浴5 min，冷却后，溶液呈______色。 答案　(1)蒸馏水　(2)滤液　(3)DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质　蒸馏水　0.14　(4)滤液　酒精　白　(5)二苯胺　蓝 解析　破碎红细胞应用蒸馏水，使之吸水涨破。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在2 mol/L的Na