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实验九 植物单细胞分离技术（理论） 一、植物细胞培养概述 指以单细胞（single cell）或细胞团（cell aggregate）为单位进行的植物组织培养方式特点： ◆操作简单 ◆试验重复性好 ◆单次实验群体大 、培养的植物细胞的特点 A、培养时生长速度慢 B、直径为20 ~ 150um，比细菌大 C、纤维素细胞壁非常脆弱 D、生理与代谢活性低 E、需求营养成分复杂 F、不易于保存 G、次生物质的合成与积累和细胞分化过程有关 、细胞培养液的性质 ◆培养液具有一定的黏度 ◆提供细胞生长发育所需的营养 ◆黏度随细胞浓度的增加而增大 ◆需不停搅拌而进行通气 二、植物细胞悬浮培养 （一）悬浮细胞培养的优点 A、提供大量的均匀的植物细胞B、细胞增殖速度比愈伤组织快C、适宜大规模培养 D、增加培养细胞与培养液的接触面，改善营养供应 E、避免有害物质的过分积累F、保证氧的充分供给 （二）悬浮培养细胞的建立与测定 1、诱导建立 诱导细胞悬浮培养的方法 A、选择一块易破碎的愈伤组织，转移到适合的培养液中，经1~2个周期振荡培养，得到呈分散状的细胞培养物B、选择有用的培养材料，进行匀浆处理，过滤，转入液体培养基中培养C、选择有用的材料多次转移与液体振荡培养，得到分散程度高的细胞悬浮培养的材料： 愈伤组织的疏松程度、分散效果的好坏2、生