生物工艺发酵液的预处理和固液分离方法资料.ppt

本章重点掌握内容 凝聚、絮凝含义 胶体双电层模型及其含义 凝聚价及其凝聚剂、絮凝剂种类 离心分离的评价指标 Bioseparations usually begin with the separation of biomass from broth .The separation commonly uses filtration or centrifugation as described. In many cases, the desired product is in the broth. Antibiotics, are commonly in the broth; so are extracellular enzymes, many polysaccharides, and most amino acids. In all these cases, the separated broth can be treated to isolate and purify the product, as a byproduct. 预处理的目的 ①分离细胞、菌体和其他悬浮颗粒（细胞碎片、核酸和蛋白质沉淀物）。 ② 除去部分可溶性杂质。 ③ 改变滤液的性质（以提高过滤速度）。 2.1 发酵液的预处理 发酵液预处理原因？ ⑴发酵液中菌体细小、粘度大。粘性杂质多，难直接过滤。 对细菌和某些放线菌菌体细小，发酵液粘度大，不能直接过滤。 由于菌体自溶，核酸、蛋白质及其他有机粘性物质的存在会造成滤液浑浊，滤速极慢。 ⑵发酵液中高价无机离子及杂蛋白的存在。 影响离交法的交换容量。 影响离交法及大网格树脂的吸附能力。 产生乳化。 影响膜过滤。 文献：青霉素发酵液中可溶性蛋白质的沉降及其在溶剂萃取中的乳化作用 如： 链霉素生产中，采用调pH至酸性（pH3.0），加热至70℃，维持半个小时的方法来去除蛋白质，能使过滤速度增大10-100倍，滤液粘度可降低1/6。 柠檬酸发酵液，采用加热至80℃以上，使蛋白质变性凝固和降低发酵液粘度，从而大大提高了过滤速度。 (4)加有机溶剂，表面活性剂。所处理的量较小。 (5)大幅度改变pH值。 (6)吸附作用 几种反应剂相互作用，或和某些溶解盐类发生反应生成不溶解的沉淀[CaSO4、AlPO4]。 生成的沉淀的作用： 能防止菌丝体粘连，使菌丝具有块状结构。 沉淀本身可作为 助滤剂。 使胶状物和悬浮物凝集。 如： 四环类抗生素生产中，采用黄血盐和硫酸锌的协同作用生成亚铁氰化锌钾K2Zn3[Fe(CN)5]2的胶状沉淀来吸附蛋白质。 环丝氨酸发酵液用氧化钙和磷酸处理，生成的磷酸钙沉淀，能使悬浮物凝固。多余的磷酸根离子，还能除去钙、镁离子。 凝聚：胶体粒子中性盐促进下脱稳相互聚集成大粒子（1mm）。机理：a 中和粒子表面电荷 b 消除双电层结构 絮凝：大分子聚电解质将胶体粒子交联成网状，形成10mm大小絮凝团的过程。机理：架桥作用 2.1.3.4 凝聚作用： ⑴发酵液的带电特性： ①发酵液中的胶体粒子表面，一般都带有负电荷。 ②发酵液中的胶粒子在界面上形成双电层。 ⑵扩散双电层结构模型： 由于 ①吸附作用 正离子被吸附 ②热运动 正离子有离开表面的趋势 ①②两相反作用的影响： 形成吸附层或紧密层：距离胶核表面约一个离子半径的stern平面以内，正离子被紧密束缚在胶核表面。 ⑷胶粒能保持分散状态的原因： 带有相同电荷和扩散双电层的结构。 水化层的形成: 依赖于胶体带电。 絮凝剂分子量 与搅拌速度，时间有关。 文献： 新型絮凝剂F－717对抗生素M－90发酵液预处理研究 微生物细胞的絮凝与微生物絮凝剂 肌苷发酵液絮凝除菌体的研究 * ⑶作为絮凝剂的条件： 分子中必须必须有长链线状的分子结构，含有较多的活性基团，可以带多价电荷，能和悬浮颗粒表面相结合。 水溶性的聚合物，分子量可以很高。 不影响产物的性能。 无毒。 * ⑷絮凝剂的类型： 细胞絮凝的种类：自身絮凝（酵母）、絮凝剂絮凝 絮凝剂类型： 化学结构：高聚物、无机盐（硫酸铝、氯化钠、磷酸钠、氯化钙和明胶等）、有机溶剂（乙醇、丙酮、甲醛）、表面活性剂 官能团：阴、阳离子、非离子 来源：天然和人工合成 * 聚丙烯酰胺 优点： 用量少 10－6 g/L 絮凝体粗大，分离效果好。 絮凝速度快 种类多。 主要用于杂质为蛋白质或菌丝体的发酵液 缺点：存在毒性（尤其阳离子）。 * 聚丙烯酸类阴离子絮凝剂。无毒。 聚苯乙烯类衍生物 无机高分子聚合物 天然有机高分子絮凝剂 壳聚糖、葡聚糖、明胶、骨胶、海藻酸钠等。 微生物絮凝剂 微生物产生的具有絮凝细胞功能的物