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（二）化学因素 溶液中的溶质可因 c 的改变而有离解、缔合、配位以及与溶剂间的作用等原因而发生偏离 L-B 定律的现象 。 例：在水溶液中，Cr(Ⅵ)的两种离子存在 如下平衡 　　Cr2O42- + H2O ? 2CrO42- + 2H+ A T 试验1 试验2 L M D N P 红线2 红线1 ALM ANP 1-65 终点法 终点法——通过检测终点吸光度的改变大小来求出被测物含量。 何为终点？如何判断？ 通常在反应终点附近连续选择两个吸光度值，求其平均值，根据两点的差值来判断反应终点。 终点法 终点时间的确认： 一、根据时间-吸光度曲线 如:Trinder反应测尿酸，反应曲线上3-5分钟 时其A趋向稳定,故可将5分钟作为反应终点。 二、根据被测物反应终点，结合干扰物的反应 情况来确定 如:溴甲酚绿法测血清白蛋白 分类 终点法： 一点终点法 二点终点法 免疫比浊法 双波长法 一点终点法 一点终点法——在时间-吸光度曲线上吸光度不再改变时，选择一个时间点测定吸光度值。 通常在反应终点附近连续读两个吸光度，求出两点的平均值，并根据两点的差值判断反应是否达到平衡。 一点终点法的设置：