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测序技术 卡丽比努尔·艾依提 应用微生物 目录 第一代测序技术 第二代测序技术（Illumina测序仪，SOLiD测序仪，454基因组测，Ion Torrent 测序） 第三代测序技术 高通量测序技术 第一代测序技术的发明人 利用DNA聚合酶和双脱氧链终止测定DNA核苷酸序列的方法。是英国剑桥分子生物学实验室的生物化学家Fred Sanger及其同事在1997年发明的。 第一代测序技术 传统的链终止法，化学讲解法，以及在它们的基础上来的各种DNA测序技术传统成为第一代DNA测序技术。 原理 第一步是短寡聚核苷酸在每个分子的相同位置上退火，然后该寡聚核苷酸就充当引物来合成与模板互补的新的DNA链。用双脱氧核苷酸作为链终止试剂（双脱氧核苷酸在脱氧核糖上没有聚合酶延伸链所需要的3－OH基团，所以可被用作链终止试剂）通过聚合酶的引物延伸产生一系列大小不同的分子后再进行分离的方法。 测序引物与单链DNA模板分子结合后，DNA聚合酶用dNTP延伸引物。延伸反应分四组（如下图）进行，每一组分别用四种ddNTP（双脱氧核苷酸）中的一种来进行终止，再用PAGE分析四组样品。从得到的PAGE胶上可以读出我们需要的序列。 这有四组试剂，第一组含有A,T,C三种脱氧核苷酸，G这一种双脱氧核苷酸 测序是根据核苷酸在某一固定的点开始，随机在某一个特定的碱基处终止，并且在每个碱基后面进行荧光标记，产