pGL3―EPO―α―MHC启动子荧光素酶报告基因质粒的构建及缺氧调控功能考察.docVIP

pGL3―EPO―α―MHC启动子荧光素酶报告基因质粒的构建及缺氧调控功能考察 　　[摘要] 目的 考察EPO-α-MHC启动子在缺氧条件下的调控表达作用。 方法 构建pGL3-EPO-α-MHC启动子编码荧光素酶报告基因的质粒，以含pGL3-EPO-α-MHC和pGL3-CMV启动子的质粒分别转染缺氧和常氧的心肌细胞（H9C2），检测荧光素酶的表达。 结果 pGL3-CMV启动子质粒在缺氧条件下的报告基因表达与常氧条件相比显著下降（P 0.05），而pGL3-EPO-α-MHC启动子在缺氧条件下能够显著上调报告基因的表达4.3倍（P 0.01）。 结论 EPO-α-MHC启动子具有缺氧调控功能。 　　[关键词] pGL3-EPO-α-MHC启动子；荧光素酶报告基因；质粒构建；缺氧调控 　　[中图分类号] R34 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）06（a）-0008-03 　　α-MHC promote是研究报道中常用的一种心肌特异性启动子，用于调控治疗基因在心肌组织的特异性表达[1]。为了增加治疗基因在心肌缺血缺氧区域的表达，本研究选用促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）作为心肌特异性启动子的缺氧反应调控元件。构建pGL3-EPO-α-MHC启动子编码荧光素酶报告基因的质粒（pGL3-EPO-α-MHC-LUC