心血管系统疾病的生物化学检测题材.ppt

存在问题 非理想的早期诊断标志，在AMI发生后6h内其敏感性远低于Mb，也不及CK-MB 。不易发现间隔较短的再梗死。 骨骼肌疾病可异常表达cTnT，导致应用cTnT出现假阳性。 虽cTnI更具心肌特异性，但一方面，cTnI试剂盒生产厂家多，抗体和检测方法不同，最低检测限和参考值存在10倍以上差异。 * 另一方面，血中cTnI大部分以cTnI-cTnC或cTnI- cTnC-cTnT二或三聚体存在，此时 cTnI抗体制备常选的中心区 28～110位氨基酸残基 较稳定。 复合体解离或标本存放时间较长， cTnI单体中心区的絲氨酸、胱氨酸残基极易被磷酸化、氧化而失去抗原性，影响测定结果。 * 游离cTnI易被磷酸化和氧化的氨基酸残基 Molecular Structure cTnI * 用钙螯合性抗凝剂可出现上述情况。肝素富含阴离子，可与cTnI形成复合物干扰测定。 因此，血清与血浆，不同抗凝剂制备的血浆间，即便同一试剂盒检测cTnI结果有较大差异。 cTnI检测急需按统一参考品 IFCC推荐cTnI-cTnC二聚体 对检测方法全程标准化，使不同试剂盒有可比性, 制定统一参考值。 * AMI后常用心肌标志物血浆动态变化示意图 * 4. 研究中的心肌损伤标志物 心肌损伤标志研究的焦点是寻找敏感、特异的早期损伤标志物。 1 脂肪酸结合蛋白 heart fatty acid binding protein, FABP FABP分子量仅14~15 kD，存在于胞浆，在细胞内脂肪代谢中起转运游离脂肪酸作用。 心肌中FABP含量丰富 0.46mg/g 湿心肌 ，是骨骼肌、肝、肾等含量的l0倍以上。 * AMI发生后0.5~1.5h即可检测到血中FABP显著升高，8h左右达峰值，可超过参考范围上限l0倍以上，约20h恢复正常。 已有检测血浆FABP的商品化夹心免疫法试剂盒，测得血浆FABP参考范围为1.57～8.97μg/L。 FABP为敏感的早期心肌损伤标志。在AMI发生后l~3h，敏感性 91% 略优于Mb。 * 为提髙FABP诊断特异性，可同时测定Mb和FABP，计算Mb/ FABP比值。 由于心肌中FABP远比骨骼肌丰富，若来源于心肌，比值趋近于4.5 10 ，而来源于骨骼肌则比值远远髙于10，趋近于47。 * 2 糖原磷酸化酶同工酶BB glycogen phosphorylase BB, GPBB 糖原磷酸化酶为糖原分解代谢限速酶，催化糖原分解生成1-磷酸-葡萄糖。 人GP为相同亚基组成的二聚体，包括BB、LL和MM三种同工酶，分别由不同基因编码。GPBB主要存在于脑和心肌，GPLL主要分布于肝细胞，GPMM则主要在骨骼肌。 GPBB分子量大 188kD ，脑组织逸出的不能透过血脑屏障，血GPBB主要来自心肌。 * 已有检测血浆GAPP的一步法夹心免疫试剂盒，与GPLL、GPMM交叉免疫反应均低于1%。正常人参考值 7μg/L。 生理条件下，GPBB主要以GPBB-糖原复合物形式与肌浆网紧密结合。心肌细胞缺血 氧 状况下糖原分解活跃，使与之结合的GPBB游离，扩散入胞浆积聚，一旦细胞膜因缺氧导致通透性增加即大量逸出。 这是分子量较大的GPBB在心肌损伤早期即可升高的机制。 * AMI发作0.5h后，即可检测到血浆GPBB升高，约6~8h达峰值，24~48h恢复正常。尤其是AMI发作后2～3h内，GPBB的敏感性略高于Mb。 由于上述释放机制，GPBB亦是反映心肌缺血 氧 的良好指标。可用于发现早期心肌缺血性损伤，监测UPA患者向AMI发展的进程。 * 2 乳酸脱氢酶 lactate dehydrogenase, LD 及其同工酶 LD是由肌 muscle, M 型和心 heart, H 型两种分子结构、免疫性和催化活性不同的肽链亚单位组成的4聚体，分子量约134 kD。LD至少有5种同工酶，按电泳条带距阳极的近远，依次命名为LD1~LD5 。 LD广泛存在于各种器官组织胞浆，按含量多少依次为肝、心、肾、骨骼肌、红细胞、脑等。 * 命 名 亚单位组成 主要分布组织及细胞 LD1 H4 心肌、红细胞、肾皮质、白细胞、肝 LD2 H3, M1 白细胞、肾、红细胞、心肌、肝 LD3 H2, M2 白细胞、脾、肺、血小板、肝、淋巴组织等 LD4 H1, M3 肝、骨骼肌、白细胞、血小板 LD5 M4 骨骼肌、肝、血小板 * 从上表可看出LD1比总LD更具心肌特异性。因此, LD作为心肌损伤标志物，包括血清总活性、LD1同工酶活性或相对比例测定。 总LD活性多根据pH 8.8~9.8环境中，LD催化L-乳酸 L 生成丙酮酸 P L→P反应 ，并将NA