秋燥感冒颗粒的含量测定.docVIP

秋燥感冒颗粒的含量测定 　　摘 要：建立反相高效液相色谱法测定秋燥感冒颗粒剂中氧化苦参碱的含量。方法：采用奥泰公司C18色谱柱（250 mm×4.6mm，5μm），甲醇-水-磷酸（5∶95∶0.025），检测波长为210nm，流速为1.0ml/min，柱温为35℃。氧化苦参碱在2～32μg?mL-1范围内呈良好的线性关系。氧化苦参碱平均回收率分别为99.6%。结论：本法简便、准确，可用于秋燥感冒颗粒剂中氧化苦参碱的含量测定。 　　关键词：秋燥感冒颗粒；含量；测定 　　秋燥感冒颗粒为浅棕色至深棕色的颗粒。秋燥感冒颗粒由桑叶、北沙参、竹叶、前胡、伊贝母、桔梗、麦冬 、苦杏仁（炒）、甘草、菊花、山豆根组成。秋燥感冒颗粒具有清燥退热，润肺止咳的功效。秋燥感冒颗粒常用于感冒病秋燥证、鼻咽口唇干燥、舌边尖红、苔薄白而干等。山豆根为双子叶植物纲豆科植物越南槐的干燥根及根茎。山豆根具有清火解毒，消肿止痛的功效[1-4]。山豆根常用于咽喉牙龈肿痛、热结便秘等。本文采用高效液相色谱法对秋燥感冒颗粒剂中的氧化苦参碱的进行了含量测定。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器：BSA124S电子分析天平（东莞康润仪器设备有限公司）；XYG-H帕恩特痕量分析级超纯水机（北京湘顺源科技有限公司）；LC-08液相色谱柱转换器（加拿大博朗科技有限公司）；C2000高温循环浴（西安夏溪电子科技有限公司）；PS3200超声波震荡器清洗机（普洛帝中国服务中心）；1800PC型紫外可见分光光度计（上海菁华科技仪器有限公司） ；RE-5298旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；TGL-18C高速台式离心机（上海楚柏实验室设备有限公司）。 　　1.2 色谱柱：奥泰公司 C18 色谱柱（250 mm×4.6mm，5μm）。 　　1.3 对照品：氧化苦参碱 购自中国药品生物制品检定所。 　　1.4 试剂：甲醇（安徽香怡化工有限公司）、乙腈（锦州仁和化工有限公司）、磷酸（宁波市镇海雷神化工有限公司）、冰醋酸（西安金瑞化工有限公司）、三乙胺（安徽香怡化工有限公司）。 　　1.5 试药：秋燥感冒颗粒剂。 　　2 测定方法确定 　　2.1 色谱条件 　　依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[5-10]。流动相：甲醇-水-磷酸（5∶95∶0.025），检测波长：210nm，流速：1.0m?min-1。柱温：35℃。理论板数按氧化苦参碱峰计算应不得低于3000。 　　2.2对照品溶液的制备 　　精密称取氧化苦参碱对照品适量，置容量瓶中，加甲醇制成每1mL含10μg的溶液，即得。 　　2.3 提取方法确定 　　2.3.1 提取溶媒的选择 　　在供试品溶液制备中，分别选用了5%浓氨甲醇溶液、三氯甲烷-甲醇-浓氨试液（40：10：1）、甲醇进行超声提取，结果表明三氯甲烷-甲醇-浓氨试液（40：10：1）分离效果、峰形及含量为最好，所以选择三氯甲烷-甲醇-浓氨试液（40：10：1）进行超声流提取。 　　2.3.2 提取时间的选择 　　取供试品适量，用三氯甲烷-甲醇-浓氨试液（40：10：1）提取，超声提取分别提取30、60、90分钟，制备供试品溶液，含量结果表明：三种提取时间结果无明显差异，为保证提取完全并缩短处理时间，采用超声流提取30分钟。 　　2.3.3 供试品溶液的制备 　　取秋燥感冒颗粒，研细，精密称定，加入三氯甲烷-甲醇-浓氨试液（40：10：1）50mL，超声提取30分钟，过滤，水浴蒸干，残渣用5ml流动相溶解，滤过。取续滤液，即得。 　　2.4 专属性试验 　　依照处方取桑叶、北沙参、竹叶、前胡、伊贝母、桔梗、麦冬 、苦杏仁（炒）、甘草、菊花，按样品制备工艺制成阴性对照样品，照2.3.3项下供试品溶液的制备方法制成阴性液，依色谱条件测定，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。 　　2.5 精密度试验 　　精密称取氧化苦参碱对照品适量，加甲醇使溶解，制成浓度为10μg?mL-1的供试品溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.63本方法精密度良好。 　　2.6 对照品的线性考察 　　精密称取氧化苦参碱对照品10.0mg，置25ml容量瓶中，加入甲醇溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取0.05、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8mL，置于10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，氧化苦参碱在2～32μg?mL-1范围内呈良好的线性关系。 　　2.7 重现性试验 　　称取同一批的秋燥感冒颗