制药用水微生物限度检查.docVIP

1．饮用水 ⑴ 取样 于500ml玻璃瓶中加入2毫升1.5%硫代硫酸钠溶液，加盖后高压蒸汽灭菌。（121℃，30分钟）。取样前，先用酒精灯将水龙头烧灼消毒，然后把水龙头完全打开，放水1～3分钟后取样。 ⑵ 细菌数检查（不得过100个/ml） ① 以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1ml充分混匀的水样，注入灭菌平皿中，倾注约15ml已融化并冷却至45℃左右的营养琼脂培养基，每个水样应倾注二个平皿，待培养基冷却后将平皿置于37℃恒温箱内培养24小时。 ② 菌落计数 按微生物限度检查法菌落计数项进行计数。 ③ 菌落计数的报告：菌落数在100以内时按实有数报告，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计算。 ⑶大肠菌群（不得检出） ①取10ml水样接种到10ml双料乳糖蛋白胨培养液中，取1ml水样接种到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中，另取1ml水样注入到9ml灭菌生理盐水中，混匀后吸取1ml（即0.1ml水样）注入到10ml单料乳糖蛋白胨培养液，每一稀释度接种5管。 对已处理过的出厂自来水，可直接种5份10ml水样双料培养基，每份接种10ml水样。 ②分离培养 将产酸产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上，于36℃±1℃培养箱内培养18h～24h，观察菌落形态，挑取符合下列特征的菌落作革兰氏染色，镜检和证实实验。 深紫黑色，具有金属光泽的菌落； 紫黑色，