实验六直接胆红素和总胆红素的测定.docVIP

山东医学高等专科学校《生物化学》实验教案 教研室 生物化学 课程 生物化学检验 专业 08检验 指导教师 徐燕 教材 生物化学检验实验 内容 实验 学 要 求 教学目的和要 求 掌握重氮法测定直胆和总胆的原理和方法 重点难点 重氮法测定直胆和总胆的原理和方法 教学媒体 学生动手操作为主，课堂演示为辅 复习旧课 测定直胆和总胆的临床意义 教学过程 讲 授 新 课 （一）原理 直接胆红素 + 无水对氨基苯磺酸 蓝色偶氮胆红素 间接胆红素 + 无水对氨基苯磺酸 蓝色偶氮胆红素 （二）仪器 分光光度计、吸量管、移液器、水浴锅 （三）操作步骤 取一次性试管做好标记，按下表操作： 加入物 试剂空白 标准管 样品管 工作试剂（ml） 1.6 1.5 1.5 标准液（ul） 100 样品（ul） 100 混匀，37水浴6min，用试剂空白调零，分光光度计578nm处，读取标准管和样品管的吸光度。 （四）结果与分析 其中 CS 20umol/L 讲 授 新 课 （五）注意事项 1.胆红素特别是直接胆红素在血清中含量甚微，操作中稍许误差便使得结果有较大出入，所以此实验要求取液准确，操作规范。 2.胆红素大于342umol/L的标本可减少标本用量，或用0.154mmol/L NaCl溶液稀释血清后重测。 3.胆红素对光敏感，标准液及标本均应尽量避光保存。 课堂提问 直接胆红素和间接胆红素的命名原则 课堂小节 直接胆红素和总胆红素的测定原理 布置作业 用理论知识分析实验结果；了解黄疸的分类 参考书目 钱士匀主编．临床生物化学和生物化学检验实验指导．第2版，北京：人民卫生出版社，2003 葡萄糖氧化酶 亚硝酸钠 二甲基亚砜