席夫碱与牛血清蛋白521讲解.docVIP

紫外光度法研究２-氨基-５-硝基吡啶水杨醛席夫碱与牛血清蛋白的相互作用 化学工程与工艺学生 李伟栋 指导老师 庞艳玲 摘要：采用紫外分光光度法研究了自制2－氨基-5－硝基吡啶水杨醛席夫碱试剂与牛血清蛋白（BSA）的相互作用。确定了最佳条件：支持电解质氯化钠的浓度为0.15mol/L，反应时间为50分钟，室温。在此条件下，席夫碱和牛血清蛋白相互作用形成稳定的络合物，络合物最大吸收波长为353nm，与2－氨基-5－硝基吡啶水杨醛席夫碱试剂的最大吸收波长363nm比较，紫移了10nm，络合比为40:1，摩尔吸光系数是8.7×103 L·mol-1·cm-1, BSA浓度在3.45～400mgL间具有良好的线性关系, 检出限为1.03mg/L。加标回收率在93.3%～100.3% 关键词：2-氨基-5－硝基吡啶水杨醛席夫碱 牛血清蛋白（BSA） 紫外分光光度法 UV spectrophotometric study of 2 - amino -5 - nitropyridine interaction Salicylideneaminio base with bovine serum albumin Student majoring in Chemical Engineering and Technology Li weidong Tutor Pang yanling Abstract: Studied using UV spectrophotometry self - made - Amino - 5 - nitropyridine salicylaldehyde Schiff base reagent with bovine serum albumin (BSA) interactions. Determine the optimal conditions were as follows: concentration of the supporting electrolyte is sodium chloride 0.15mol / L, the reaction time was 50 minutes at room temperature, 40:1 complex.Under this condition, the Schiff base and bovine serum proteins interact to form a stable complex, the maximum absorption wavelength of 353nm (with a 2 - amino-5 - Compare Nitropyridine salicylaldehyde Schiff base reagent maximum absorption wavelength of 363 purple shifted 10nm) optimal concentration of BSA is 5.1×10-6mol / L Key words: 2 - amino-5 - Compare Nitropyridine salicylaldehyde Schiff base reagent bovine serum albumin (BSA) UV spectrophotometry 引言2－氨基-5－硝基吡啶水杨醛席夫碱，考察了2－氨基－5－硝基吡啶水杨醛席夫碱与牛血清蛋白(BSA)的相互作用。 通过探究适宜条件下席夫碱与牛血清蛋白相互作用的紫外光谱，考查了复合物形成的最佳反应时间、反应温度、共存物质的干扰等条件，通过对实验数据的分析得到了一定条件下体系吸光度与牛血清蛋白浓度之间的线性关系，从而建立了席夫碱与牛血清蛋白相互作用的紫外分光光度法。方法操作简单，灵敏度高，可用于牛血清蛋白的快速测定。 １1.1 主要试剂和仪器 TU-1810PC型紫外吸收分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司生产)，配石英比色皿(1 cm)；ESJ-180型电子天平（沈阳龙腾电子有限公司）； HH-S-2.4型电热恒温水浴锅（山东潍坊精鹰医疗器械有限公司）；pHS-3C酸度计(上海精密科学仪器有限公司) 牛血清蛋白（北京奥博星生物技术有限责任公司）；2－氨基－5－硝基吡啶水杨醛席夫碱，自制。 5.1×10-5mol/L BSA溶液：称取牛血清蛋白0.3450ｇ67000计算[3]，溶于蒸馏水，转移至100mL容量瓶，定容至刻度线记为A溶液。 ??2－氨基-5－硝基吡啶水杨醛席夫碱溶液：称取8.4mg2－氨基－5－硝基吡啶水杨醛席夫碱于烧杯中，溶于适量DMF有机溶剂，转移至100ml容量瓶，定容至刻度线，记为Ｂ