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第五章 酶 一、酶的概念 二、分类和命名 三、化学本质 四、结构与功能的关系 五、酶作用的专一性 六、作用机制 七、酶促反应的速度和影响因素 八、酶活力测定 九、制备 十、应用 1. 酶的分类 水解酶催化底物的加水分解反应。 主要包括淀粉酶、蛋白酶、核酸酶及脂酶等。 例如，脂肪酶(Lipase)催化的脂的水解反应： 2. 酶的分类 氧化-还原酶催化氧化-还原反应。 主要包括脱氢酶(dehydrogenase)和氧化酶(Oxidase)。 如，乳酸(Lactate)脱氢酶催化乳酸的脱氢反应。 2. 酶的分类 转移酶催化基团转移反应，即将一个底物分子的基团或原子转移到另一个底物的分子上。例如， 谷丙转氨酶催化的氨基转移反应。 2. 酶的分类 裂合酶催化从底物分子中移去一个基团或原子形成双键的反应及其逆反应。 主要包括醛缩酶、水化酶及脱氨酶等。 例如， 延胡索酸水合酶催化的反应。 2. 酶的分类 异构酶催化各种同分异构体的相互转化，即底物分子内基团或原子的重排过程。例如，6-磷酸葡萄糖异构酶催化的反应。 2. 酶的分类 合成酶，又称为连接酶，能够催化C-C、C-O、C-N 以及C-S 键的形成反应。这类反应必须与ATP分解反应相互偶联。 A + B + ATP + H-O-H ===A ? B + ADP +Pi 例如，丙酮酸羧化酶催化的反应。 丙酮酸 + CO2 ? 草酰乙酸 2. 酶的分类 核酸酶是唯一的非蛋白酶。它是一类特殊的RNA，能够催化RNA分子中的磷酸酯键的水解及其逆反应。 酶的辅因子 酶的辅因子是酶的对热稳定的非蛋白小分子物质部分，其主要作用是作为电子、原子或某些基团的载体参与反应并促进整个催化过程。 (1)传递电子体：如 卟啉铁、铁硫簇； (2)传递氢（递氢体）：如 FMN/FAD、NAD/NADP、C0Q、硫辛酸； (3)传递酰基体：如 C0A、TPP、硫辛酸； (4)传递一碳基团：如 四氢叶酸； (5)传递磷酸基：如 ATP，GTP； (6)其它作用： 转氨基，如 VB6 ；传递CO2，如 生物素。 1．结合部位 酶分子中与底物结合的部位或区域一般称为结合部位。 活性基团 活性基团： 酶分子中与酶活性相关的氨基酸基团 主要包括： 亲核性基团：丝氨酸的羟基，半胱氨酸的巯基和组氨酸的咪唑基。 酸碱性基团：天门冬氨酸和谷氨酸的羧基，赖氨酸的氨基，酪氨酸的酚羟基，组氨酸的咪唑基和半胱氨酸的巯基等。 （二）酶原激活 酶原：没有活性的酶的前体。 酶原的激活：酶原在一定条件下经适当的物质作用可转变成有活性的酶。酶原转变成酶的过程称为酶原的激活。 本质：酶原的激活实质上是酶活性部位形成或暴露的过程。 胰蛋白酶的激活 （三）同功酶 同功酶：能催化同一化学反应的一类酶。 活性中心相似或相同：催化同一化学反应。 分子结构不同：理化性质和免疫学性质不同。 六、酶作用机制 （一）酶的催化作用、过渡态、分子活化能 前提： 酶只能催化热力学上允许进行的反应。（△G0 ) 过渡态：反应物分子处于被激活的状态，是反应途径中分子具有最高能量的形式。 活化能：过渡态与常态分子之间的能量差（Ea） 。 酶催化作用的本质：降低活化能 酶促反应：E + S === ES === ES× ? ?? EP ?? E + P 反应方向, 即化学平衡方向,主要取决于反应自由能变化?G。 反应速度快慢,则主要取决于反应的活化能Ea。 催化剂的作用是降低反应活化能Ea,从而起到提高反应速度的作用? 反应过程中能的变化 （二）中间产物学说 在酶催化的反应中，第一步是酶与底物形成酶－底物中间复合物。当底物分子在酶作用下发生化学变化后，中间复合物再分解成产物和酶。 E + S ==== E-S ??? P + E ? 许多实验事实证明了E－S复合物的存在。E－S复合物形成的速率与酶和底物的性质有关。 无酶参与 S→P（要求S的自由能高） 有酶参与下 E + S →ES →E + P 诱导契合机制 B.诱导契合 C.产物脱离 (四）酶与反应过渡状态互补 反应速度与形成的过渡状态稳定性密切相关。 在酶催化的反应中，与酶的活性中心形成复合物的实际上是底物形成的过渡状态， 所以，酶与过渡状态的亲和力要大于酶与底物或产物的亲和力。 （五）抗体酶 既是抗体又具有催化功能的蛋白质 普通化学反应—随机碰撞（受浓度、碰撞角度影响） 邻近作用提高了酶的活性中心底物的浓度 定向作用缩短了底物与催化基团间的距离 提高反应速度（成功率）108倍 严格定向定位，具有专一性 2“张力”和“形变” 底物与酶结合诱导酶的分子构象