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杜仲雌花花芽分化的观察研究 摘要 杜仲具有较高的药用价值、经济价值和资源价值。以杜仲不同发育阶段的雌花为材料，对其石蜡切片进行解剖观察，了解其花芽分化的全过程。观察结果表明，杜仲花芽分化的整个过程可分为5个时期：未分化期、分化初期、花序分化期、总苞形成期和雌蕊形成期，为其丰产栽培及育种提供解剖学依据。 关键词 杜仲；雌花；花芽分化；石蜡切片；解剖观察 中图分类号 R282.71；Q949.751.5 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）19-0177-02 杜仲是我国特产药材，野生资源日趋减少[1]，优良种质更亟需普查与保护，并用以指导栽培生产。近年来，国内杜仲产品开发前景堪忧，目前杜仲生产面临母树资源枯竭、种子产量不足的困境，而无性繁殖又具有一定的局限性[2]。杜仲在国外早已引种成功并且还有一定程度的发展，尤其在日本等国，不仅获得了多项有关杜仲的专利，还形成了一定的生产能力，研究开发的进展情况已向杜仲的故乡提出严峻的挑战[3]。目前，国内外尚未对杜仲的开花过程进行系统的解剖观察，鲜有对其开花结果特性进行详细研究的报道。因此，笔者先从雌花的解剖观察着手进行研究。以杜仲不同发育阶段的雌花为材料，对其石蜡切片进行解剖观察，了解其花芽分化的全过程。通过观察发现，杜仲花芽分化的整个过程可分为5个时期，即未分化期、分化初期、花序分化期、总苞形成期和雌蕊形成期。总结出不同时期外部形态的主要区别特征和结构特点，为其丰产栽培及育种提供解剖学依据[4-5]。 1 材料与方法 1.1 材料来源 材料来源于中国林科院经济林研究开发中心（河南郑州），分17批次采取，从2007年2月13日初花芽开始萌动时取样，至3月26日截止，每天8：00取样。按同一标准取样，均取同一株树、同一部位、同一高度的外围花，确保所采样品能代表该品种当天的发育水平[6-8]。所采材料经过修理立即用卡诺固定液固定。固定时间12 h左右，之后用70%酒精保存待用。 1.2 试剂及仪器设备 药品主要有切片石蜡、卡诺氏固定液、二甲苯、酒精、纯水、蛋白胶、树脂胶等；仪器有YD-1508A轮转式切片机、YD-B智能型生物组织烤片机、电热恒温培养箱、电热鼓风干燥机、真空抽气器、ZMD-A自动磨刀机、奥林巴斯摄影生物显微镜等。 1.3 观察方法 杜仲雌花花芽分化的观察采用常规石蜡切片法，主要步骤包括固定、冲洗、脱水、浸蜡、包埋、切片、粘片、脱蜡、媒染、封片等。 2 结果与分析 2.1 花芽未分化期 从图1可以看出，花序原基顶端生长锥呈现呈圆尖状的特征，其顶端分生组织由内、外2个部分构成：内部为原体部分，其细胞排列不规则；外部为原套，外部细胞排列整齐而致密。 2.2 花芽分化初期 从图2可以看出，与花芽未分化期进行比较，其生长点长大，顶端呈半圆形，呈变宽趋势，原套和原体可分。整个花序原基高度增加，并且基部宽度也加大。 2.3 花序分化期 从图3可以看出，原体细胞同时进行平周和垂周分裂，原套细胞进行垂周分裂，整个花序原基基部进一步增大，生长锥顶端形成3个突起，形成小花原基，其中两侧突起分别为第1、2小花原基，而生长锥中央顶部为第3小花原基，其进一步发育，可以形成椭圆形的小花原始体。 2.4 雌花总苞形成期 从图4可以看出，小花原始体发育初期，顶部一突起首先形成，即为总苞苞片原基，然后相继显现其他3个突起，即为小苞片原基，上述四者连合成总苞。 2.5 雌蕊形成期 从图5可以看出，雌蕊原始体进一步进行分化，形成小而致密的细胞，即为中央胚珠原基，其细胞质较浓，染色较深。 3 结论与讨论 以杜仲不同发育阶段的雌花为材料，对其石蜡切片进行解剖观察，了解其花芽分化的全过程，对花芽分化时期进行划分。观察结果表明，杜仲花芽分化的整个过程可分为5个时期，即未分化期、分化初期、花序分化期、总苞形成期和雌蕊形成期。并对不同时期的分化特点和形态特征进行区别与分析，在生产上具有重要的现实意义。 由于不同年份之间气温变化有差异，根据以往掌握的发育时间进行采样并不能非常准确地把握发育时期。熟悉雌花外部形态与解剖结构的对应关系，对通过外部形态判断雌花花芽的分化程度，以及确定取材时间具有重要的指导意义。 4 参考文献 [1] 崔克明.杜仲研究的历史、现状和展望[J].西北林学院学报，1994，9（4）：51-57. [2] 杜红岩，谭运德.我国杜仲栽培及产业发展现状的思考[J].经济林研究，1996，14（S1）：137-140. [3] 胡世林.国外研究杜仲的某些进展与动向[J].国外医学中医中药分册，1994，16（5）：13. [4] 杜红岩.我国的杜仲胶资源及其开发潜力与产业发展思路[J].经济林研究，2010（3）：1-6. [5] 杜红岩，赵戈，卢绪奎.论我国杜仲产业化与培育技术的发展[J].林业