学习情境二培养基制备技术资料.ppt

灭菌结束后，等压力降回零时才可打开门 放入杀菌锅之物品，盖子不可旋太紧或太松 灭菌注意事项 拿灭菌物品后记得带耐热手套 将已灭菌装有琼脂培养基的试管，趁热置于木棒或玻棒上，使成适当斜度，凝固后即成斜面。斜面长度不超过试管长度l／2为宜。 7.搁置斜面 称药品时严防药品混杂，一把药匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净，擦干，再取另一种药品。瓶盖也不要盖错。 在融化琼脂的过程中，人要在电炉旁看着，以免培养基因沸腾而溢出烧杯。同时，需不断搅拌，以防琼脂糊底烧焦。注意带上棉纱手套防止烫伤——注意安全 分装过程中，注意不要使培养基沾在管口上，以免沾污棉塞而引起污染。 拿灭菌物品后记得带耐热手套。 注意事项 l．配制培养基有哪几个步骤?在操作过程中应注意些什么问题?为什么? 2．培养基配制完成后，为什么必须立即灭菌?若不能及时灭菌应如何处理?已灭菌的培养基如何进行无菌检查? * 微生物检验基础技能训练模块 —— 6 微生物的营养与培养基制备技术 学习情境二 培养基制备技术 任务一 培养基的类型与应用 任务二 配制培养基的基本原则 任务三 培养基制备技术 任务一 培养基的类型与应用 培养基：应科研或生产的需要，由人工配制的、适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物用的营养基质（混合养料）。 特点：任何培养基都应具备微生物所需要的五大营养 要素，且应比例适当。所以一旦配成必须立即灭菌。 培养基的分类 　　培养基种类繁多，根据其成分、物理状态和用途可将培养分成多种类型。 按成分不同划分 天然培养基 合成培养基 含用化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物 牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基 化学成分完全了解的物质配制而成的培养基 高氏1号培养基、查氏培养基 按物理状态不同划分 固体培养基 液体培养基 在液体培养基中加入一定量凝固剂，使其成为固体状态，琼脂含量一般为1.5%-2.0% 琼脂含量一般为0.2%-0.7% 不加任何凝固剂 半固体培养基 固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏 观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定 大规模工业生产及在实验室进行微生物的基础理论和应用方面的研究 按用途不同划分 基础培养基 鉴别培养基 含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基 用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基 用于鉴别不同类型微生物的培养基 选择培养基 在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基 微生物产生某种代谢产物，与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征变化 牛肉膏蛋白胨培养基是最常用的基础培养基 加富培养基 特殊营养物质包括血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液等 在培养基中加入相应特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长 目的明确 营养协调 理化条件适宜 经济节约 任务二 配制培养基的基本原则 1.目的明确 根据不同的微生物的营养要求配制针对强的培养基。 培养化能自养型的氧化硫杆菌的培养基组成为： S 10g MgSO4.7H2O 0.5g NH4 2SO4 0.4g FeSO4 0.01g H2PO4 4g CaCl2 0.25g H2O 1000ml 培养化能异养的大肠杆菌一种培养基是由下列化学成分组成： 葡萄糖 5g NH4H2PO4 1g NaCl 5g MgSO4.7H2O 0.2g K2HPO4 1g H2O 1000ml 2.营养协调 培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好，营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需，浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用。 培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和代谢产物的形成和积累，其中碳氮比（C/N）的影响较大。 碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值，有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。 3.理化条件适宜 pH 水活度 氧化还原电位 4. 经济节约 以粗代精 以野代家 以废代好 以国代进 以简代繁 以氮代朊 以烃代粮 以纤代糖 任务三 培养基制备技术 实训项目 目的要求 了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。 学习和掌握高压蒸汽灭菌的具体操作方法和技术。 培养基 种类多 根据培养目的和检测需要不同，选择配制不同的培养基。  技术原理 培养基根据用途分类 1.基础培养基：能满足各种微生物的营养需求加富培养基：加入某种微生物生长繁殖所需的营养物质，使其快速生长，便于分离。2.选择培养基：加入某种物质抑制其他微生物生长，使目标微生物得到富集，便于分离。3.鉴别培养基：用来检测微生物的某些代谢特性。 高压