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第三章 基因工程的诞生与发展 3.1 基因工程的诞生 现代分子生物学领域理论的三大发现及技术上的三大发明对基因工程的诞生起到了决定性的作用。 3.1 基因工程的诞生 3.1 基因工程的诞生 3.1 基因工程的诞生 3.1 基因工程的诞生 3.1 基因工程的诞生 3.1 基因工程的诞生 3.1 基因工程的诞生 3.1 基因工程的诞生 3.1 基因工程的诞生 3.1 基因工程的诞生 3.1 基因工程的诞生 3.2 基因工程的含义及基本技术路线 按照人们的愿望,进行严密的设计,通过体外DNA重组和转基因等技术,有目的地改造生物种性,使现有的物种在较短时间内趋于完善,创造出更符合人们需求的新的生物类型,这就是基因工程。 3.2 基因工程的含义及基本技术路线 在文献中常见的有遗传工程、基因工程、基因操作、重组DNA技术(以及基因克隆、分子克隆)等。 这些术语所代表的具体内容都是彼此相关的,在许多场合下被混同使用,很难作出严格的区分。从某种意义上讲,它们之间的差别,只不过是各自考虑的角度和强调的侧重点不同罢了。 基因工程理论依据 1. 不同基因具有相同的物质基础。 2. 基因是可切割的。 3. 基因是可以转移的。 4. 多肽与基因之间存在对应关系。 5. 遗传密码是通用的。 6. 基因可以通过复制把遗传物质信息传递给下一代。 3.2 基因工程的含义及基本技术路线 3.2 基因工程的含义及基本技术路线 基因工程打破了常规育种难以突破的物种之间的界限,可以使原核生物与真核生物之间,动物与植物之间,甚至人与其他生物之间的遗传信息进行重组和转移。 人的基因可以转移到大肠杆菌中表达,细菌的基因可以转移到植物中表达。 3.2 基因工程的含义及基本技术路线 三个基本要素: (1)供体:来自某一生物的DNA或人工合成的 DNA,一般称为外源DNA。 (2)受体:接受外源DNA的细胞,如细菌、酵母菌 或哺乳动物细胞。 (3)载体:是运输DNA的工具,是经过遗传学改造 的质粒、噬菌体或病毒。载体DNA与外 源DNA在体外构成重组体的形式,把外 源DNA运送到受体细胞。 3.2 基因工程的含义及基本技术路线 3.3 基因工程研究内容 3.3 基因工程研究内容 基因工程的发展是与克隆载体构建密切相关的,由于最早构建和发展了用于原核生物的克隆载体,所以以原核生物为对象的基因工程研究首先得以迅速发展。 Ti质粒的发现以及成功的构建了Ti质粒衍生的克隆载体后,植物基因工程研究随之迅速发展。动物病毒克隆体的构建成功,使动物基因工程也有了一定的进展。 3.3 基因工程研究内容 构建克隆载体是基因工程技术路线中的核心环节,构建新的克隆载体仍是今后研究的重要内容之一。 3.3 基因工程研究内容 基因工程受体与载体是一个系统的两个方面。前者是克隆载体的宿主,是外源目的基因表达的场所。受体可以是单个细胞,也可以是组织、器官、甚至是个体。 用作基因工程的受体可分为两类,即原核生物和真核生物。 3.3 基因工程研究内容 常用作受体的原核生物: 大肠杆菌,蓝细菌等。 常用作受体的真核生物: 酵母菌,单细胞小球藻,衣藻等。 随着克隆载体的发展,高等植物,动物的生殖细胞或胚细胞以及人的体细胞都可作为基因工程的受体。 3.3 基因工程研究内容 基因工程研究的基本任务是开发人们特殊需要的基因产物,这样的基因统称为目的基因。 具有优良性状的基因理所当然是目的基因。而致病基因在特定情况下同样可作为目的基因,具有很大的开发价值。 3.3 基因工程研究内容 1. 主要是通过构建基因组文库或cDNA文库,从中筛选出特殊需要的基因。 2. 近年来也广泛使用PCR技术直接从某生物基因组中扩增出需要的基因。 3. 另外,对于较小的目的基因也可用人工化学合成。 3.3 基因工程研究内容 第一类是与医药相关的基因; 第二类是抗病、虫害和恶劣生境的基因; 第三类是编码具特殊营养价值的蛋白或多肽的基因。 3.3 基因工程研究内容 基因工程工具酶指体外进行DNA合成、切割、修饰和连接等系列过程中所需要的酶,包括DNA聚合酶、限制性核酸内切酶、修饰酶和连接酶等。 3.3 基因工程研究内容 DNA聚合酶用于人工合成引物等DNA小片段以及含基因的较大的DNA片段,还用于制备DNA探针。 3.3 基因工程研究内容 限制性核酸内切酶用于有规律地切割DNA,把提供的DNA原材料切割成具有特定末端的DNA片段
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