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实验一、用显微镜观察多种多样的细胞
1、光学显微镜的结构结构:
(1)光学部分
目镜、镜筒、物镜、遮光器(有大小光圈)和反光镜(有平面镜和凹面镜)
(2)机械部分
镜座、倾斜关节、镜臂、载物台(上有通光孔、压片夹)、镜头转换器、粗、细准焦螺旋。
2、目镜无螺纹,镜头越长,放大倍数越小;物镜有螺纹,镜头越长,放大倍数越大(反眼正物)。
3、呈像原理:倒立放大的虚像。(物镜质量的优劣直接影响成像的清晰程度)
4、放大倍数:目镜和物镜二者放大倍数的乘积(显微镜放大倍数是指直径倍数,即长度和宽度,而不是面积)
5、显微镜的使用:取镜和安放(装镜头)→对光(转动粗准焦螺旋【顺时针】,俯首侧视镜筒慢慢下降注意镜头和载物台的距离。调节视野亮度只可用遮光器和反光镜)→低倍镜观察找到物像后,把要观察的物像移到视野中央→高倍镜观察(转动转换器,把低倍镜移走,换上高倍镜,只准用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰,直到物像清楚为止)
6:放大倍数与视野的关系:放大倍数越小,视野大,看到的细胞数目越多,视野越亮;放大倍数越大,视野范围越小,看到的细胞数目越少。
7.装片的移动:物像在何方,就将载玻片向何处移。(原因:物像移动的方向和实际移动玻片的方向相反)
8.污点判断:
(1)污点随载玻片的移动而移动,则位于载玻片上;
(2)污点不随载玻片移动,换目镜后消失,则位于目镜;换物镜后消失,则位于物镜;
(3)污点不随载玻片移动,换镜后也不消失,则位于反光镜上。
9、放大倍数变化与视野范围内细胞数量变化的关系
(1)一行细胞数量的变化,用细胞数除放大倍数就是放大后看到的细胞数量
(2)圆形视野范围内细胞数量变化,用细胞数除放大倍数的平方就是放大后看到的细胞数量
实验二 检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质
还原性糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖) 脂肪 蛋白质 材料 苹果、梨(白色或近于白色) 花生种子 豆浆或鸡蛋清 试剂 斐林试剂
甲液:0.1g/ mL NaOH溶液
乙液:0.05g/ mL CuSO4溶液
(甲乙液混合用) 苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液(用显微镜观察) 双缩脲试剂
A液:0.1g/ mL NaOH溶液
B液:0.01g/ mL CuSO4溶液
(先加A液再加B液) 结果 (水浴50~65℃加热)浅蓝色→棕色→砖红色 橘黄色或红色 紫 色(不加热,摇匀即可)
实验三:观察DNA、RNA在细胞中的分布
1.实验原理:甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。
2.所用试剂及其作用:
0.9%的NaCl溶液:保持细胞原有形态
盐酸:能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。
3、结果
DNA RNA 材料 人的口腔上皮细胞 试剂 甲基绿 吡罗红 颜色 绿色(细胞核) 红色(细胞质)
DNA主要存在细胞核中,少数存在于细胞质的线粒体和叶绿体中,RNA主要存在于细胞质中,少量存在于细胞核中,如mRNA
实验四: 用高倍镜观察线粒体和叶绿体
1、实验原理:叶绿体的辨认依据:叶绿体是绿色的,呈扁平的椭圆球形或球形。
线粒体辨认依据:线粒体的形态多样,有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。
健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。
2、实验材料:藓类的叶、黑藻的叶(叶子薄而小,叶绿体清楚,可取整个小叶直接制片)
3、实验结果
线粒体 叶绿体 材料 人的口腔上皮细胞 藓类的叶、黑藻的叶 试剂 健那绿染液 不需染色 颜色 蓝绿色 (本身呈现)绿色
实验五 观察植物细胞的质壁分离和复原
1、质壁分离的原理:当细胞液浓度小于外界溶液浓度时,细胞就会通过渗透作用而失水,细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中,使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大,当细胞不断失水时,原生质层就会与细胞壁分离。
2、质壁分离复原的原理:当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,细胞就会通过渗透作用而吸水,外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中,整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态,紧贴细胞壁,使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。
3、实验材料——紫色的洋葱鳞片叶(细胞具有紫色大液泡,容易观察),质量浓度为0.3g/mL的蔗糖溶液,清水等。
4、实验方法步骤
(1)制作洋葱表皮临时装片
(2)观察洋葱(或水绵)细胞,看到液泡大,呈紫色,原生质层紧贴着细胞壁。
(3)观察质壁分离现象。液泡由大变小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离。原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。糖液浓度过高细胞会严重失水
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