pbs精确配方1.docVIP

这是本人精心总结出来的 0.1M PBS：1000ml蒸馏水中加NaCl 9g Na2HPO4.12H2O 6g NaH2PO4 .2H2O 0.4gPH：7.2为博士德配方 分子克隆上的PBS配方：NaCl: 8.00gKCl: 0.20gNa2HPO4*H2O: 1.56gKH2PO4: 0.20g1. 0.01mPBS (PH7.4)Na2HPO4?12H2O（磷酸氢二钠） 3.473gNaH2PO4?12H2O（磷酸二氢钠） 0.226gNacl 0.9g三蒸水 1000ml2. 加氯化钠的称PBS，加氯化钾、氯化钠的称KPBS。不加氯化钠、氯化钾的称PB。 关于缓冲溶液PB的配制，好多参考书如生物技术实验的后面均附有缓冲溶液的配制配方，可以根据需要配制PH5.7～8.0的PB缓冲溶液。S就是指氯化钠的含量，一般为0.85％，即是100ml里面加0.85克，这个时候的PBS的浓度是0.1M的。一般在免疫组化洗涤中采用0.01M的PBS，pH7.0～7.4。我们在实验中直接将0.1M的稀释十倍，即可。最好能现配现用。母液4℃可以保持1～2周，影响不大。 0.01M PBS （PH 7.2）（g/ L）NaCl 8.0KCl 0.2KH2PO4 0.2Na2HPO4.12H2O 2.9用1N的NaOH调节PH 值至7.2ddH2O定容至1000ml，高压灭菌 0.01PBS液：NaH2PO4.2H2O 0.5gNa2HPO4.12H2O 5.9gNaCl 9g加双蒸水至1000ml差不多刚好pH7.4 PBS的配制称取NaCl 8.00g KCl 0.20g KH2PO4 0.20g Na2HPO4?H2O 1.56g，加入蒸馏水至总体积为1000ml，溶解后过滤除菌待用。 0.01mol/L，pH7.4的PBS0.2mol/L Na2HPO4 81ml0.2mol/L NaH2PO4 19ml氯化钠 17g蒸馏水加到 2000ml其实道理是一样。 0.1M的PB（不加氯化钠）配方：1.储备A液，磷酸氢二钠35.6克，加重蒸水溶解至1000ml。储备B液，磷酸二氢钠13.8克，加重蒸水溶解至500ml。2.工作液（0.1M），PH A液（ml） B液（ml） 重蒸水（ml）7.0 30.5 19.5 507.4 40.5 9.5 508.0 47.35 2.65 50 0.1M的PBS配方：储备A液： 1M的氯化钠溶液（氯化钠5.844克，加重蒸水至100ml ）储备B液：0.2M磷酸氢二钠（Na2HPO4 5.678克加重蒸水至200ml 或Na2HPO4?12H2O14.32克加重蒸水至200ml ；储备C液：0.2M 的磷酸二氢纳（NaH2PO4）2.76克加水至100ml或（NaH2PO4?12H2O）3.12克加重蒸水至100ml；工作液：A液 12.5ml 62.5ml 12.5mlB液 8.1ml 40.5ml 81mlC液 1.9ml 9.5ml 19ml加重蒸水至 100ml 500ml 1000ml（在工作液中 磷酸缓冲液浓度为0.1M,L氯化钠浓度为0.125M,PH为7.3—7.4，于4度冰箱中克保存三月） 我纯化蛋白用的PBS：1.37 mM 的 NaCl 8g，2.7 mM的 KCl 0.2g，10 mM 的 Na2HPO4·12H2O 3.58g，2 mM的KH2PO4 0.27g，然后加NaOH　用PH计调PH值8.0。 从美国来的配方，我们实验室一直用的这个，很好使的！我们科在临床上做了很多免疫组化，结果很漂亮。是工作浓度，根据自己的要求配浓缩液Na2HPO4?12H2O（磷酸氢二钠） 13.42gNaH2PO4?2H2O（磷酸二氢钠） 1.95gNacl 42.5g三蒸水 5000ml关键是pH，一定要调在7.4左右，其实配方都差不多，关键是pH。可以用NaOH和盐酸调。 (1)0.2M Na2HPO4: Na2HPO4·12H2O 71.64g加蒸馏水至1000ml;(2)0.2M NaH2PO4: NaH2PO4·2H2O 35.6g加蒸馏水至1000ml。按81.0ml(1)+19.0ml(2)比例，再加17gNaCl和1900ml蒸馏水，即为0.01MPBS 加入蒸馏水时不要全部加完，最后剩余100ml不要加，用NaOH或Hcl调节pH之后，再将蒸馏水补足。 “0.01M到底是指的什么？”指的是H2PO4或HPO4的浓度。0.2M的H2PO4或HPO4取100ml，稀释20倍成2000ml。此时的浓度为0.2/20=0.01M。 一般免疫组化用PBS都只包含Na2