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在线凝胶渗透色谱―气相色谱―串联质谱非衍生化法测定食品中氯丙醇 摘要：建立了食品中氯丙醇类化合物的非衍生化在线凝胶渗透色谱气相色谱串联质谱（Online GPCGCMS/MS）测定方法，目标化合物包括3氯1，2丙二醇（3MCPD）、2氯1，3丙二醇（2MCPD）、1，3二氯2丙醇（1，3DCP）和2，3二氯1丙醇（2，3DCP）。样品中加入氘代同位素内标后，采用ExtrelutTM NT硅藻土进行固相支持液液萃取净化，用正己烷淋洗去除非极性杂质，以乙酸乙酯萃取目标物，萃取液经浓缩后直接采用Online GPCGCMS/MS测定。4种氯丙醇在0.005～1.000 mg/L范围内呈良好线性，相关系数均大于0.999，4种氯丙醇的检出限在0.002～0.005 mg/kg之间，定量限在0.005～0.01 mg/kg之间。以空白酱油样品为代表性基质的3个水平（0.02， 0.1和0.5 mg/kg ）的加标回收率和相对标准偏差（RSD， n 6）分别为94.8%～106.3%（2.2%～10.3%）， 91.8%～108.8%（2.1%～10.6%）和83.1%～109.4%（1.3%～9.4%）。采用本方法分别对酱油、水解植物蛋白液（粉）、料酒、鸡精、面包和糕点样品进行检测，均得到了满意的测定结果。 关键词 ：食品； 氯丙醇； 在线凝胶渗透色谱气相色谱串联质谱； 固相支持液液萃取净化； 非衍生化 1 引 言 氯丙醇类化合物（包括3MCPD， 2MCPD， 1，3DCP和2，3DCP）早期在于酸水解植物蛋白液及以其为原料的调味品（如酱油等）中发现[1～3]，之后又陆续在面包、香肠、咖啡、谷物类等食品中检出[4～8]。 毒理学研究表明，3MCPD可以通过血睾屏障和血脑屏障，并在体液中广泛分布，具有生殖、肾脏和神经毒性[9，10]。WHO/FAO食品添加剂和污染物联合专家委员会（JECFA）确定1，3DCP具有体外遗传毒性和生殖毒性，会引起大鼠肝、肾脏、甲状腺等的癌变[11]；2，3DCP会对肝、肾脏及精子产生影响[11]。 目前，食品中氯丙醇的检测通常采用七氟丁酰咪唑（HFBI）、七氟丁酰酐（HFBA）[12]、三氟乙酸酐（TFAA）[13]和苯硼酸[1]等衍生试剂将氯丙醇衍生，利用气相色谱质谱（GCMS或GCMS/MS）法进行测定[14～18]。我国食品安全国家标准 GB/T 5009.1912006《食品中氯丙醇含量的测定》中氯丙醇的测定采用的是以HFBI衍生化的GCMS方法[19]。在上述方法中，衍生化步骤繁冗复杂；衍生物稳定性较差，需衍生后尽快完成测定；衍生试剂昂贵，增加样品检测成本，并且对环境湿度要求极高，否则易吸潮变质。 Online GPCGCMS是将凝胶渗透色谱和GCMS在线联用的分析检测技术，能将样品净化液中分子量较大的脂类、色素等干扰物质与目标物分离，减少基质影响，降低分析背景，提高重现性，实现连续自动的部分前处理和仪器测定的在线分析，加快分析速度和提高分析结果的准确性。与GCMS相比，GCMS/MS将离子碎片施予适当能量再次打碎，形成二级离子碎片，增强了结构解析和定性能力，更有效地排除基质干扰。本研究建立了非衍生化的Online GPCGCMS/MS法直接测定食品中氯丙醇的检测方法，同时对食品样品的前处理方法进行了优化。本方法对样品的适用性广泛，不仅适用于调味品，也适用于面包、糕点等其它食品样品。 2 实验部分 2.1 仪器、试剂与材料 Online GPCGCMS/MS系统（日本Shimadzu公司），GPC系统包括SIL20ADvp自动进样器、ShodexEV200AC凝胶渗透色谱柱（150 mm × 2 mm）、CTO20ASvp柱温箱、SPD20Avp紫外检测器；GCMS/MS系统包括QP2010Plus气相色谱仪、TQ8040型质谱联用仪，并配有PTV2010大体积进样器；MilliQ超纯水器（美国Millipore公司）；G560E型涡旋混合器（美国Scientific Industries公司）；NEVAPTM111型吹氮浓缩仪（美国Organomation Associates公司）；G560E涡旋混合器（美国Scientific Industries公司）；AL204分析天平（瑞士梅特勒公司）；NDO400型电热恒温鼓风干燥箱（杭州汇尔仪器设备有限公司）；微量移液器（德国Eppendorf公司）。 3MCPD（纯度98%，德国Aldrich公司）；五氘代3氯1，2丙二醇（D53MCPD，纯度≥99%，德国DrEhrenstorfer公司）；1，3DCP、2，3DCP、五氘代1，3二氯2丙醇（D51，3DCP）和五氘代2，3二氯1丙醇（D52，3DCP）（纯度≥97%，德国Fluka公司）；2M