实验二 培养基的配制和灭菌 目 的 要 求 了解培养基的配制原理和方法,掌握其配制过程。 学习并掌握高压蒸汽灭菌的原理和操作技术 实 验 原 理 由人工方法配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质称为培养基。主要用于微生物的分离、培养、鉴定、菌种保藏或积累代谢产物等方面。 可按组成成分和物理状态进行分类。 高压蒸汽灭菌 实 验 材 料 各种药品:牛肉膏、蛋白胨、琼脂等; 称量工具:托盘天平、量筒、称量纸、角匙; 分装工具:铁架台、漏斗、pH试纸; 包扎工具:牛皮纸、扎绳、棉花。 1配方: NaCL 0.5%、蛋白胨 1%、牛肉膏 0.3%,琼脂1.5-2.0%, pH7.2-7.4 使用10% NaOH和 5% HCL调节 。 2配制: 称量及加热溶化----加琼脂----定容----调pH----分装、加塞、包扎。 3分装: 每组装3个三角瓶,150ml/瓶,包扎、灭菌。将剩余的250ml分装大试管(装量为试管长度的1/5),加棉球,包扎、灭菌。 平板计数琼脂(PCA)Plate Count Agar1000ml 配方:? ?胰蛋白胨 5.0g ;酵母浸粉? 2.5g;葡萄糖 ? 1.0g? ?琼脂 15.0g;蒸馏水? 1000ml;pH 7.0士0.2 制法:? ?将上述成分加于蒸馏水中,煮沸溶解,调节pH。分装试管或锥形瓶,121℃
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