动物细胞融合和单克隆抗体课件讲解.pptVIP

本资料由书利华教育网（即数理化网）为您整理 本资料由书利华教育网（即数理化网）为您整理 本资料由书利华教育网（即数理化网）为您整理 温故知新 温故知新 比较 动物细胞融合技术意义 思考 怎样大量获得化学性质单一、特异性强的抗体呢？ 单克隆抗体的制备 单克隆抗体的制备 单克隆抗体的制备 单克隆抗体 单克隆抗体的应用 5. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 （ ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A.②④ B.①③⑤　　 C.①②③④ D.②③ * 广水一中高二生物组 * 资料：1970年LD.Frye和H.Edidin的人—鼠细胞融合实验：分别用绿色和红色荧光染料标记两种细胞的蛋白质 细胞膜上的蛋白质分子能够运动 荧光标记 蛋白质 诱导 融合 40分钟后 370C 如何实现人-鼠细胞融合? 动物融合后有何用途? 本资料由书利华教育网（即数理化网）为您整理 动物细胞融合和单克隆抗体 本资料由书利华教育网（即数理化网）为您整理 问题思考 Q1 Q2 获得白菜-甘蓝利用了什么技术？ 植物体细胞杂交 此技术的过程？ 本资料由书利华教育网（即数理化网）为您整理 ？ ？ ？ ？ 再分化 ？ 植物细胞杂交技术利用什么原理？ 用什么方法可以诱导植物细胞融合？ 一、原理： 细胞膜具有流动性 细胞的全能性 二、诱导方式： 物理法、化学法 植物细胞杂交技术最终获得什么？ 三、用途： 获得杂种植株 一、动物细胞融合 1、概念： 是指 个或 动物细胞 形成 细胞的过程，又称 。 两 多个 结合 一个 细胞杂交 动物体细胞杂交过程如何？与植物体细胞杂交相比有何不同？ 请阅读课本P52，填写下表 本资料由书利华教育网（即数理化网）为您整理 获得杂交细胞 获得杂种植株 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、 振动、电激） 化学（聚乙二醇） 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 结果 诱导方法 本资料由书利华教育网（即数理化网）为您整理 动物细胞融合的意义 1、细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。 2、利用杂交瘤技术，制备单克隆抗体。 成功年代 细胞来源 生物种类 酵母菌—鸡 原生质体—血红细胞 1975年 人—胡萝卜 腹水癌细胞—原生质体 1976年 人—小鼠 纤维肉瘤细胞—畸胎瘤细胞 1978年 Q1、传统的抗体生产方法及缺陷是什么？ 传统的抗体生产方法是向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需要的抗体。这种生产抗体的方法产量和纯度都很低，而且制备的抗体特异性差。 Q2、B淋巴细胞有什么特点？ B淋巴细胞能产生抗体，但每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。 二、单克隆抗体制备技术 本资料由书利华教育网（即数理化网）为您整理 B淋巴细胞 －－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞 －－能无限增殖 杂交细胞 设计思路： 一个 （体外不能无限增殖） 本资料由书利华教育网（即数理化网）为您整理 问题思考 Q1 Q2 细胞两两融合后，有哪些类型？ B-B;B-瘤;瘤-瘤 哪种是需要的类型，要筛选吗？ 本资料由书利华教育网（即数理化网）为您整理 问题思考 Question 经过选择培养基筛选的杂交瘤细胞群进行克隆是否就得到产生纯度高的抗体？ 还需怎么办？ 本资料由书利华教育网（即数理化网）为您整理 有限稀释法 稀释多次 稀释 对能产生特异性抗体的单个杂交瘤细胞 进行克隆，即单细胞克隆。 由它产生的抗体，即单克隆抗体。 将培养皿孔内的上清液取出，检测抗体。 本资料由书利华教育网（即数理化网）为您整理 杂交 细胞 灭活的病毒等手段 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 经免疫的小鼠 提取 杂交瘤细胞 第一次筛选 用特定的 选择性培养基 第二次筛选 能产生专一抗体的杂交瘤细胞 体外培养 注射到小鼠腹腔 提取单克隆抗体 1.单抗制备过程中应用了那些技术？ 动物细胞融合 动物细胞培养 2.此过程中至少进行了几次筛选？目的相同吗？ 3.单克隆抗体的优点？ 特异性强，灵敏度高，可大量制备。 单克隆抗体制备过程 本资料由书利华教育网（即数理化网）为您整理 （1）作为诊断试剂——最广泛应用 准确、高效、简易、快速 （如同位素标记单克隆抗体，可诊断肿瘤、心血管畸形等） 本资料由书利华教育网（即数理化网）为您整理 （2）运载药物 生物导弹 单克隆抗体 + 药物（治疗肿瘤） “生物导弹” —单抗导向，药物为弹头 单克隆抗体的应用