分子生物学3.6讲解.ppt

3.6 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 P105/113---8/11: 简述原核生物和真核生物mRNA的区别。 原核生物mRNA的特征 半衰期短。 许多原核生物mRNA以多顺反子的形式存在。 原核生物mRNA的5’端无帽子结构，3’端没有或只有较短的多聚（A）结构。 对于第一个顺反子来说，一旦mRNA的5`端被合成，翻译起始位点即可与核糖体相结合，而后面几个顺反子翻译的起始就会受其上游顺反子结构的调控。 存在两种情况: 真核生物mRNA的结构模式 5’Capping 通过 5′→ 5′磷酸二酯键在原初mRNA的5’端倒扣一个“G”。 在新生mRNA链达到50个核苷酸前，甚至可能在RNA Pol II 离开转录起始位点之前，帽子结构就已加到mRNA的第一个核苷酸上了。 5′末端加上鸟苷是由鸟苷转移酶催化的 。 帽子结构是GTP和原5’三磷酸腺苷（或鸟苷）缩合反应的产物。 mRNA的帽子结构常常被甲基化。 帽子结构 多聚腺苷化(polyadenylation)反应要经过2个阶段 (1)首先将一个短的寡聚A序列(10nt)加到3’端， 此反应绝对依赖于AAUAAA序列，这是由poly(A)聚合酶在特殊因子指导下完成的。 (2)寡聚A尾巴延伸到240nt的长度。 此反应并不需要AAUAAA序列，但需要一个识别寡聚A并指导poly（A）聚合酶延伸的刺激因子。 Poly-A in the 3’ end promotes the efficient recycling of ribosomes Poly (A) - 尽管大部分真核mRNA有poly (A)尾巴，细胞中仍有多达1/3没有poly (A)的mRNA，将其称为Poly (A) – 约1/3的Poly (A) –mRNA编码了不同形式的组蛋白,其余2/3的Poly (A) –可能带有与Poly (A) +组分相同的遗传信息。 Poly(A)+ RNA can be separated from other RNAs by fractionation on Sepharose-oligo(dT). 真核生物mRNA大都具有polyA尾巴,这一特性已被广泛应用于分子克隆.常用寡聚dT片段与mRNA上的polyA相配对,作为反转录酶合成第一条cDNA链的引物. * 本章主要内容： 3.1 RNA的结构、分类和功能 3.2 RNA转录的基本过程 3.3 转录机器的主要成分——RNA聚合酶 3.4 启动子与转录起始 3.5 原核生物与真核生物转录产物比较 3.6 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 3.7 真核生物RNA的转录后加工 3.8 RNA的编辑、再编码和化学修饰 原核与真核生物mRNA的特征比较 原核生物中: mRNA的转录和翻译发生在同一个细胞空间， 这两个过程几乎是同步进行的 。 真核细胞中： 真核细胞mRNA的合成和功能表达发生在不同的空间和时间范畴内。 mRNA以较大分子量的前体RNA出现在核内， 只有成熟的、相对分子质量明显变小并经化学修饰的mRNA才能进入细胞质，参与蛋白质的合成。 mRNA的组成： 编码区(coding region)：从起始密码子AUG开始经一连串编码氨基酸的密码子直至终止密码子。 5’端上游非编码区(5’UTR)：位于AUG之前不翻译的区域。 3’端下游非编码区(3’UTR) ：位于终止密码子之后不翻译的区域。 P84/94最后一段 半衰期短 原核生物mRNA的特征 原核生物中，mRNA的转录和翻译是在同一个细胞空间里同步进行的，蛋白质合成往往在mRNA刚开始转录时就被引发了。 大多数细菌mRNA在转录开始1分钟后就开始降解。mRNA降解的速度大概只有转录或翻译速度的一半。 2. 许多原核mRNA以多顺反子的形式存在： 原核细胞的mRNA(包括病毒)有时可以同时编码几个多肽。 原核生物mRNA的特征 Prokaryotic mRNA (polycistrionic) 单顺反子mRNA (monocistronic mRNA): 只编码一个蛋白质的mRNA。 多顺反子mRNA(polycistronic mRNA): 编码多个蛋白质的mRNA。 第一个蛋白质合成终止以后，核糖体分解成大、小亚基，脱离mRNA模板，第二个蛋白的翻译必须等到新的小亚基和大亚基与该蛋白起始密码子相结合后才可能开始。 前一个多肽翻译完成以后，核糖体大、小亚基分离，小亚基也可能不离开mRNA模板，而是迅速与游离的大亚基结合，启动第二个多肽的合成. 在这个顺反子翻译产生多肽的过程中，核糖体的运动破坏了后续顺反子的二级结构，使起始位点较容易与核糖体相结合形成起始复合物（P