REACH法规 第四卷译稿-33.docVIP

B.33综合慢性毒副作用与致癌作用的检测 1. 方法 1.1. 引言 见引言总章B部分 1.2. 定义 见引言总章B部分 1.3. 参考物质 无 1.4. 测定方法描述 长期综合慢性毒性致癌测定的目的是确认晡乳动物长期使用测定物后致癌因素的影响。 致癌性测试结尾部分是用致少一个卫星测试组和对照组进行一个补充测定。在致癌测定中给予卫星测试组的最高剂量可能会高于测试最高剂量组水平。在致癌测定中动物做一个总的毒性检查和致癌反应。在测试组，动物做一个总毒性检查。 测定物通过一个合理的方法在动物样品样品的主要生命周期中每周七次，每次一组，给多组动物使用。在测试中和测试后，每天观察动物样品的毒性迹象和癌的发展。 1.5. 质量标准 无 1.6. 测定方法描述 在测定之前，动物至少要在测定要求的条件下喂养五天以上。测定幼崽被随意的分配到各组。 1.6.1. 动物样品 较适宜的物种是小鼠。基于先前测定结果的其它动物也可使用。应使用实验室常用的健康幼畜。且在断奶之后立即使用测定物。 研究之初，动物样品的体重差异不要超过平均值的20%。如果在长期性的研究之前有预备性的小型实验，那么在研究中应用相同的品系。 1.6.2. 数目和性别 对啮齿动物，在每一剂量水和对照组小组至少要有100个动物（雌性50，雄性50）。雌性必须是未生育且未孕的。如果期间准备有动物样品的死亡，那么数目应随实验完成之前预备放弃的数目的增加而增加。 除了癌之外，还要做病理学研究的副组应包括每种性别20，而其它测试组则每种性别10个动物。 1.6.3. 剂量水平和使用频率 为了做致癌测定，除了对照组之外，至少使用三个剂量水平。最高剂量应能导致最小的中毒迹象，如少许的体重的减少（少于10%），切除了癌症之外没有其他影响生命周期的影响。 最低剂量不应打扰正常生长，发育和动物样品的寿命或引起任何毒性的迹象。总之，不能高于最高剂量的10%。 中间剂量界于最高和最低剂量之间。 剂量的选择主要考虑到之前毒性的研究和测定的实验数据。 为了长期的毒性测定，测定中还应包括一个额外的处理组和对照组。最高剂量应产生直接的毒性迹象。 正常使用频率是每天一次。如果药物是掺杂在饮用水或食物中使用必须是连续可得的。 1.6.4. 对照组 应使用一个除了不使用测定物之外，其它任何一方面都和测定组一样的对照组。 在一些特殊情况下，如涉及到喷物剂的吸入性研究或用到乳化剂的无特征生物活动的口饲研究，还必须使用一额外的不使用该处理的对照组。 1.6.5. 给药途径 三种主要的给药途径是：口饲，皮肤的，呼吸。给药途径的选择主要取决于测定物的物理和化学特性以及可能的在人身上使用的方式。 1.6.5.1口饲测定 当测定无能被食道吸收，并且该种途径也适用于人类，除非有禁忌症象，这种途径是优越的。可以和食物，溶解在饮用水或胶囊的方式给动物使用。理想上，应该每周七次用量，如果每周五次，在不使用药剂的阶段动物可能恢复并使毒性消失，从而影响结果和后面的评估。然而，基于实际考虑，每周五次的剂量仍可接受。 1.6.5.2皮肤性测定 皮肤注射可被选用来模拟人类的使用方式且被用作引发皮肤损伤的示范体式。 1.6.5.3.吸入性测定 因为吸入性比其它流程表现出更为复杂的技术问题，这里给出这种使用方式的更多细节。必须注意，在某些特殊场合下，气管内输入可能有其它的选择。 长期服用往往基于人类的使用方式。在测定室浓度平衡后，每周五次，每次6小时，或基于外界的使用，即每周七天，每次22-24小时，并在每天的相同时间一个小时的喂养时间。动物被测定以一定浓度的测定物。 间歇使用和连续使用的一个主要的区别是间歇使用时动物每天都有17-18个小时的恢复期，在周末则更长。 选择何种使用方式主要取决于研究的目的和模拟的人类使用方式。然而，必须考虑到某些技术难题。例如，连续实验的优点可能由于测定中需不停的喂水和喂实，且需更复杂的喷雾和蒸气的产生和监听技术而取消。 1.6.6. 测定室 动物样品的测定室应该设计用来取得长期的至少每小时12次换气来确保足够的氧气和均匀的大气氛围。对照组室的设计和建造必须和测定室一致以保证除了在使用测定物之外在其它任何方面都是可比的。测定室里必须维持少许的负压力以防测定物渗出。测定室应尽可能的降低动物样品的密度。总的，为了保持测定室里空气的稳定性，动物样品的总体积不应超过测定室体积的5%。 测量和监控包括： 气流：通过不停的监控保持测定室气流速度适宜。 浓度：在日常服用期间，测定物浓度不应超过平均值的15%，在该项研究周期间，每天浓度应尽可能保持一致。 温度和湿度：对啮齿类动物，温度控制在222。C，室内湿度在30-70%，除非使用水将测定物悬浮在空气中。不停控制使两者适宜。 粒子尺寸测量：测定室里大气中液体或固体喷雾剂粒子的分布必须确定