红细胞检验的基本方法资料.pptVIP

三、抗碱血红蛋白检测将待检的溶血液与一定量的NaOH溶液混合，作用1分钟后加入半饱和硫酸铵中止碱变性反应。胎儿血红蛋白（HbF）抗碱变性作用强，没有变性存在于上清液中，HbA变性沉淀，取上清液于540nm处测定吸光度，检测出HbF的浓度。此试验也称为碱变性试验，成人＜2％；新生儿＜40％ ①HbF绝对增多：珠蛋白生成障碍性贫血，重型者达30％～90％，中间型常为5％～30％，轻型小于5％。遗传性胎儿血红蛋白持续综合征患者，可高达100％。 ②HbF相对增多可见于骨髓纤维化、白血病、浆细胞瘤等恶性疾病及再生障碍性贫血、PNH、卟啉病等。 ③HbF生理性增多见于孕妇和新生儿。 四、HbF酸洗脱法检测HbF具有抗碱和抗酸作用，其抗酸能力比HbA强。将血涂片于酸性缓冲液中孵育，含HbF的红细胞不被酸洗脱，可被伊红染成红色，而含HbA的红细胞均被酸洗脱，不能被伊红着色。正常血片中含HbF的着色红细胞：成人＜0.01（1％）新生儿0.55～0.85（55％～85％）以后渐渐下降，2岁后幼儿＜0.02（2％）孕妇可有轻度增加。着色细胞增加：珠蛋白合成障碍性贫血重型患者大多数红细胞染成红色；轻型患者可见少数染成红色的细胞；遗传性胎儿血红蛋白持续综合征红细胞均为红色。 五、异丙醇沉淀试验不稳定血红蛋白较正常血红蛋白更容易裂解，在异丙醇这种能降低血红蛋白分子内部氢键的非极性溶剂中，不稳定血红