222动物细胞融合和单克隆抗体.docVIP

专题二细胞工程——动物细胞工程 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 【学习目标】1. 列表比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同 2. 举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。1.理解和掌握动物细胞融合的原理、过程和意义。 2.理解和掌握单克隆抗体制备的过程的步骤和应用 【学习难点】单克隆抗体的制备过程。 2、结果：形成___________。 3、过程：两个或多个细胞________________________。 4、意义：克服了___________的不亲和性，成为研究___________、___________、肿瘤和 _____________培育的重要手段。 例1、动物细胞融合的目的中最重要的是 （ ） A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 探究一：动物细胞的融合 1、植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别（学生填下表） 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞融合原理 细胞膜的流动性 融合过程 先使细胞分散开 诱导方法 电激、振动、离心、聚乙二醇 结果 应用 培育植物新品种 意义 相同点 原生质体融合原理相同；原生质体融合的方法相似 2、植物体细胞杂交和动物细胞融合的主要区别是什么？ （1）动物细胞融合不需要去除 ； （2）动物细胞融合常使用 ，而植物细胞融合不用； （3）植物杂交细胞可以培养成 ，而动物杂交细胞则不可。 3、为什么可以使用灭活的病毒促进动物细胞融合？不灭活的病毒能作为诱导剂吗？ ?? 4、动物细胞的融合最有价值的应用是什么?细胞融合完成的标志是什么？ 二、单克隆抗体 1、抗体 ⑴产生细胞：_________________。 ⑵成分：__________。 ⑶特点：从__________中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。 2、单克隆抗体的制备 (1)过程 ⑵杂交瘤细胞的特点：____________________、____________________。 ⑶单克隆抗体的优点：____________、____________、____________。 探究二：单克隆抗体制备的原理 1、常规抗体制备的方法及特点？ 传统的抗体生产方法是向动物体内反复注射某种 ，使动物产生 ，然后从动物 中分离所需要的抗体。这种生产抗体的方法 和 都很低，而且制备的抗体 差。 2、B淋巴细胞有什么特点？ 3、若要想获得大量的单一抗体，如何做呢？ 4、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的，那么，怎样解决这一问题的呢？ 5、小结以下内容： ◆ 利用____________________产生特异性抗体的功能。 ◆ 利用____________________无限增殖的特性。 ◆ 利用____________________技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞。 ◆ 利用____________________技术大量培养杂交瘤细胞。 探究三：单克隆抗体制备的过程 1、如何获得B淋巴细胞？ 要得到能产生所需抗体的B淋巴细胞，必须对小鼠进行 处理，即给小鼠皮下或脾内注射特定的 ，为保证B淋巴细胞的数量和质量，往往需要进行初次免疫、二次免疫和加强 ，然后取免疫小鼠的脾获得B淋巴细胞。 2、选择杂交瘤细胞的两步筛选的目的各是什么？ 第一步筛选的目的是获得 。 原因是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合后用聚乙二醇处理诱导融合，这样处理后的细胞中有以下五种： 、 、 、 、 的细胞， 细胞才是我们需要的杂种细胞。筛选的方法是在特定的 性培养基（HAT选择培养基）中培养，由于骨髓瘤细胞缺乏 酶或