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机械切割法 4、 基因文库、cDNA文库获取目的基因 cDNA文库 动物血液生物反应器 目前已成功在小鼠、山羊、猪、牛、鸡及绵羊中生产了组织血纤维蛋白溶酶原激活因子和抗凝集因子(t-PA,血凝集因子Ⅷ和Ⅸ以及蛋白C)、人免疫球蛋白、α1－球蛋白、β－球蛋白、干扰素、胰蛋白酶、生长激素、磷脂蛋白、血红蛋白、乳铁蛋白等。 动物血液生物反应器血液量大，可作为转基因动物专一表达的组织之一，利用转基因猪血液生产人类血红蛋白已证明是可行的，不过血液生物反应器生产的蛋白质或多肽在血液循环时会影响动物的健康状况。 基因剔除小鼠的制作 gene knockout 三种技术的融合 first second third 简要过程 一、 基因打靶的必备条件 （一）ES细胞 取小鼠胚胎早期内细胞团，即小鼠受精卵发育4-5d胚胎细胞。 将ES细胞进行体外遗传操作后－重新植回小鼠胚胎，可发育成胚胎的各种组织－最后形成嵌合体小鼠（chimeric mouse）－如果这种ES细胞能发育成小鼠的生殖细胞－通过交配可得到基因剔除或替换的小鼠。 （二）打靶载体（正-负选择系统---PNS） 打靶载体含有两种筛选标志：neo阳性筛选标志；HSV－tk阴性筛选标志。 1.neo阳性筛选标志： 将n