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Generation of germline-competentinduced pluripotent stem cells Keisuke Okita, Tomoko Ichisaka Shinya Yamanaka Nature 基因工程的基本内容 背景 知识 背景 知识 背景 知识 实验背景 上一个实验 发表在cell 已经证实可以通过将4种转录因子 C-myc,Sox-2,Oct3/4,klf4 用反转录病毒导入小鼠原纤维细胞（MEF cells）并筛选fbx15的表达而得到多潜能干细胞 ips cell . 存在的问题： 1.Fbx15 iPS cells 与胚胎干细胞（ES）相比具有不同的基因表达和DNA甲基化模式 2. Fbx15 iPS cells 不能参与嵌合体胚胎的形成 可能的原因：将Fbx15的表达作为选择的标准不合适 为什么选择Nanog作为标记 实验过程 实验方法 简单序列长度多态性（simple sequence length polymorphism，SSLP）是据串联重复排列微卫星基序两侧的单一序列设计引物，对微卫星序列（microsatellite DNA或simple sequence repeats，SSR）进行扩增，由微卫星基序重复数目的变异而产生多态性。由于中某一特定的微卫星的侧翼序列通常都是保守性较强的单一序列，因