长白山野生绣球菌菌丝体组织分离及营养特性研究.pptVIP

延边大学本科毕业论文 长白山野生绣球菌菌丝体组织分离及营养特性研究 The Mycelium Tissue Isolation and The Study on Nutritional Characteristics of Wide Sparassia crispa of Changbai Mountain 主要内容 材料与方法 前 言 1 2 结果与分析 3 结 论 4 前 言 绣球菌[Sparassia crispa（Wulf.）Fr.]又名绣球蕈、对花菌、干巴菌、椰菜菌、蜂窝菌、白绣球花、绣球蘑。分类学上隶属于担子菌亚门、层菌纲、非褶菌目、绣球菌科、绣球菌属（Sparassis）。 绣球菌子实体肉质洁白细嫩，有茴香气味，鲜美异常，营养价值高，含有17种氨基酸，基本包含所有的必需氨基酸。 药用价值 增加白血球，提高人体免疫力，对癌细胞具有直接杀伤作用 绣球菌素具抗真菌活性 治疗高血压、糖尿病、肝病等多种疾病 本试验对采自长白山林区的野生绣球菌进行组织分离，并研究其菌丝体生长的营养条件，筛选出适宜长白山林区野生绣球菌菌丝生长的最佳营养条件，为开发、利用这一野生资源提供理论依据。 材 料 本研究所用野生绣球菌标本由延边大学农学院食用真菌实验室课题组成员于2010年7月采自长白山林区，由吉林农业大学图力古尔教授鉴定。将标本带回室内自然阴干，干燥后即可用于子实体组织分离菌种，纯化培养，获得试验所用菌株。 试验材料 供试培养基 PDA培养基：马铃薯 200 g，葡萄 20 g，琼脂 20 g，加水至1000ml，pH自然。 基础培养基：葡萄糖 20 g，蛋白胨 2 g，MgSO4 0.5 g，琼脂20 g，加水至1000ml， pH自然。 试验方法 1.组织分离 1.1 材料及用具 野生绣球菌型大、颜色正、无霉、无虫害的子实体，无菌超净工作台，斜面培养基（10管），剪刀，镊子，酒精灯 1.2 组织分离 组织分离过程在超净工作台内，整个过程要遵循无菌操作。 1.3 纯化培养 剪刀剪取部分 绣球菌子实体 75%酒精棉擦拭2-3遍 酒精棉包住剪取的 子实体约1min 无菌剪刀将四周 边缘剪掉 选取远离基 部的组织 长≈0.5㎝ 宽≈0.2㎝ 无菌 镊子 夹取 酒精灯 外焰上方 2-3次 接种于斜面培 养基中下部 25℃恒温培养箱 暗培养 12天左右 新生长出 的菌丝 接种块接种于 平板培养基上 25℃培 养 室 纯化培养 所得菌丝接种 于斜面培养基上 25℃恒温培养箱 暗培养 菌丝长满 试管后 4℃冰箱中保存 2.不同碳源对绣球菌菌丝体培养特性的影响 碳源处理：分别设置果糖、淀粉、乳糖、蔗糖、甘露醇、麦芽糖包括葡萄糖各20 g为碳源处理，以不加任何碳源为对照。 重复次数：5次 测定项目：菌丝长速，菌丝长势，菌落色泽及菌落边缘等特征。 数据分析：采用Excel 2003进行整理，用SPSS 11.5软件中Duncan检验进行差异显著性分析。 氮源处理：以基础培养基为标准，分别设置酵母膏、麸皮、黄豆粉、KNO3、(NH4)2SO4、NH4Cl包括蛋白胨各2 g为不同氮源处理，以不加任何氮源为对照。 重复次数、测定项目、数据分析同碳源处理。 3.不同氮源对绣球菌菌丝体培养特性的影响 无机盐处理：分别设置MnSO4、CaSO4、ZnSO4、CuSO4包括MgSO4各0.5 g为不同无机盐处理，以不加任何无机盐为对照。 重复次数、测定项目、数据分析同碳源处理。 4.不同无机盐对绣球菌菌丝体培养特性的影响 结果与分析 图2 分离纯化后的绣球菌菌株 1.野生绣球菌组织分离 2.不同碳源对绣球菌菌丝体培养特性的影响 注：“+”表示菌丝稀疏、纤弱， “++” 表示菌丝密、长势壮， “+++” 表示菌丝浓密、粗壮。 小写文字母表示P0.05水平上的差异显著性。数据为5个重复的平均值±SE。 表1 不同碳源对绣球菌菌丝体生长的影响 Table1 The effects of different carbon sources on mycelium growth of Sparassia crispa 碳源 Carbon Sources 日均长速(mm·d-1) Dry weight of the mycelia ( mm·d-1) 菌丝长势 Mycelium growth vigor 菌丝色泽 Mycelium colour 边缘整齐度 Shape of margin 淀粉 Starch 1. 14±0.18 a +++ 洁白 White 整齐 Regular 乳糖