02-蛋白质化学.ppt

AA的重要化学反应 AA的化学反应主要是指它的α-氨基和α-羧基以 及侧链上的功能团所参与的反应. 1.α-氨基参加的反应 2.α-羧基参加的反应 3.氨基、羧基共同参加的反应 4.侧链R基的反应 定性、定量、基团保护、顺序分析、 结构、功能研究 1 与亚硝酸反应：放出氮气，氮气的一半来自氨基氮，一半来自亚硝酸，在通常情况下测定生成的氮气的体积量可计算氨基酸的量，此反应可用于测定蛋白质的水解程度。 1.由α-氨基参加的反应： 2 与甲醛的反应：用过量的中性甲醛与氨基酸反应，可游离出氢离子，然后用NaOH滴定，从消耗的碱量可以计算出氨基酸的含量。此法称为间接滴定法。 3 与2,4-二硝基氟苯（2,4-DNFB）的反应（Sanger反应）： 生成黄色的二硝基苯-氨基酸衍生物。 4 与苯异硫氰酸酯（PITC）反应（Edman反应）： 生成苯乙内酰硫脲-氨基酸。 5 与丹磺酰氯（DNS-Cl）的反应： 生成荧光物质DNS-氨基酸。 （3）、 4 、 5 反应用于蛋白质的N-末端的测定。 Sanger法。2,4-二硝基氟苯在碱性条件下，能够与肽链N-端的游离氨基作用，生成二硝基苯衍生物（DNP）。 在酸性条件下水解，得到黄色DNP-氨基酸。该产物能够用乙醚抽提分离。不同的DNP-氨基酸可以用色谱法进行鉴定。 Sanger ---二硝基氟苯（DNFB）法**