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负荷尿中维生素B1的测定---荧光法 营养学系 李 丹 目 的 水溶性维生素在机体内存留时间短，满足机体需要后，多余的部分迅速从尿中排出，因此不易发生中毒情况，但长期供给不足时，很快会出现缺乏症状。而当日常摄入量达不到机体需要量时，摄入维生素制剂将首先留在体内满足机体需要，从而尿中排出量较少，反之亦然。因此，可由尿中排出的维生素量来判断体内水溶性维生素的营养水平。 评价标准 清晨排空小便后，空腹口服维生素B1 5mg，根据季节饮水200~500ml左右，收集服药后4h内所有尿液，并在尿瓶中加入1g左右草酸，使尿液PH值保持在3~5，以防止维生素B1降解。用量筒量取尿液总体积并记录，做好标记后于4℃短时保存或-20℃长期保存。 评价标准 原 理 维生素B1 硫色素（噻嘧色素） 步 骤 收集负荷尿 加样操作 测定荧光强度 结果计算 注意事项 尿液加草酸后保存，并做好标记。 不稳定试剂如维生素B1标准应用液、碱性K3[Fe CN 6]等现用现配并避光。 操作过程避光、迅速。 萃取时要振荡均匀，分层后吸取水层时要有耐心。 注意荧光光度计的正确使用，读值顺序为C~B~A。 比色皿四面用擦镜纸擦拭干净，并禁用手触摸。 所有玻璃器材需浸酸处理，以消除荧光物质干扰。 称取K3[Fe CN 6]时禁用金属匙，以防治金属物质干扰，另外K3[Fe CN 6]与亚铁盐会生成蓝色沉淀。 * * ＞400μg 200~400μg 100~200μg ＜100μg 充裕 正常 不足 缺乏 K3[Fe CN 6] 碱性 420nm：K F/C * * *