免疫组化联合抗体在胸腹水沉渣石蜡包埋病理诊断中的应用观察.docVIP

免疫组化联合抗体在胸腹水沉渣石蜡包埋病理诊断中的应用观察 　　摘要：目的 探讨在胸腹水沉渣石蜡包埋中联合应用免疫组化进行检查的效果。方法 选取我院恶性及存在恶性倾向的体液标本共56例，对其进行沉渣石蜡包埋、切片，采用免疫组化法进行检查，观察检查结果。结果 沉渣石蜡包埋联合免疫组化检测法检出的阳性率为82.1%，高于液基细胞学检测法，组间比较有差异（P0.05）。结论 在胸腹水沉渣石蜡包埋中联合应用免疫组化进行检查，能够提升临床检出率，确定肿瘤细胞的来源及其发病部位，为临床治疗提供参考意见。 　　关键词：胸腹水沉渣石蜡包埋；免疫组化；诊断 　　胸腹水是临床上一种常见的并发症，临床上对其进行诊断时往往采用体液细胞学检测法，但这种检测方法的诊断率相对较低。 　　1 资料与方法 　　1.1一般资料 选取于2013年9月～2015年9月我院各个科室送检的胸腹水标本共260例。其中，患者的年龄41～79岁，平均年龄（56.67±3.29）岁。依据患者的临床资料与标本的镜下形态选取恶性及存在恶性倾向的体液标本共56例。 　　1.2方法 　　1.2.1切片制作方法 将选取的56例标本进行离心，然后舍弃上清液，吸取沉淀物后，将其制作成1张液基细胞涂片，采用滤纸将剩余的沉淀物进行包埋，包埋完成后进行组织学标号，并将其与组织标本放置于脱水机中，按照组织标本的制作方法对其进行固定、脱水、透明以及浸蜡，制成石蜡组织块后，再将其制成3～4μm的切片。 　　1.2.2免疫组化染色方法 检测方法使用Elivision法，抗体采用CEA、CK-H以及CKlow等，试剂采用福州迈新生物技术有限公司生产。染色方法具体如下：首先，将切片进行常规脱蜡至水，洗液采用PBS。然后，滴入3%的过氧化氢，于常温下将其放置10min，并依据相关要求进行抗原修复操作，再滴入一抗，将其放置于4℃的冰箱中过夜。最后，向其滴入二抗，DAB显色后，再采用苏木素进行复染，并用盐酸乙醇对其进行分化，并将切片脱水、封片。 　　1.3评价指标 阳性的评判标准主要包括三种，分别是：①CEA、D2-40以及Tg等部分肿瘤细胞的细胞质着色；②CK-H、CKlow、Calretin以及CA125肿瘤细胞的细胞膜着色；③Ki-67、TTF-1肿瘤细胞的细胞核着色。 　　1.4统计学方法 采取统计学软件SPSS19.0对上述数据处理，计数采取率（%），组间率对比采取χ2检验，对比以P0.05有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1两种方法检测胸腹水的检出率比较分析 沉渣石蜡包埋联合免疫组化检测法检出的阳性率为82.1%，高于液基细胞学检测法，组间比较有差异（P0.05）。见表1。 　　2.2免疫组化检测法结果分析 沉渣石蜡包埋联合免疫组化检测法检出的46例患者中，其中，表现为肺腺癌的患者共21例，表现为鳞癌的患者共10例，表现为卵巢癌的患者共4例，表现为胃腺癌的患者共9例，表现为间皮瘤的患者共2例。见表2。 　　3 讨论 　　胸腹水脱落细胞学检查是临床上一种常用的检测方法，该方法具有简便、准确性高等特点，是临床上诊断良恶性胸腹水的一种常用方法[1]。近几年，随着检测技术的不断发展，膜式超薄液基细胞学检测技术以及沉渣石蜡包埋法已经广泛应用于胸腹水细胞的涂片中，其中，采用沉渣石蜡包埋法制作切片，不仅可以提升切片的制作数量，保存细胞的完整性，提升临床检出率，同时还能够对其进行免疫组化染色，在此基础上还可以联合使用抗体检测，从而能够对肿瘤细胞进行有效分类[2]。 　　目前，临床上采用胸腹水脱落细胞学检查时，诊断较为困难的是对间皮细胞与癌细胞的区分，特别是当间皮细胞退化后，由于不具有典型性，更易被误诊[3]。针对较难确诊的患者，可以进一步采用免疫组化联合抗体法进行检查。临床实践中，我们依据单个抗体对不同的肿瘤细胞具有不同的特异性与敏感性的原理，在此基础上，根据胸腹水沉渣石蜡包埋切片的结果选取相应的抗体，进而采用多种抗体进行联合检测[4]。目前，在胸腹水细胞学涂片中，我们常常采用Calretin、CK-H、CEA以及TTF-1四种抗体进行肿瘤的鉴别。其中，Calretin属于一种钙结合蛋白，该物质主要存在于人体的神经元以及其他细胞中，常见于间皮瘤中，而在腺癌中则较少见，因此，该物质可以作为恶性间皮瘤的标志物[5]；CK-H属于一种高分子量的细胞角蛋白，往往在人体皮肤的基底细胞、棘层细胞以及部分前列腺基底细胞等细胞层均有所表达，既可以作为鳞癌与腺癌之间鉴别的标志物，同时还可以作为间皮瘤与腺癌之间鉴别的标志物[6]；CEA主要存在于人体各种腺皮上皮源性肿瘤中，特别是在各种腺癌细胞中广泛存在，其中，该物质在人体的胃肠道腺癌中具有较高的阳性率，而在人体的体腔间皮细胞中则不存在，且在间皮瘤