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杉木组织培养的初步研究 摘要：杉木组培技术研究对优化杉木品种，提高杉木生产力有重要意义。本文先介绍杉木的生态繁殖特性，然后详细解析杉木组培技术要点，包括外植体的选择和处理，愈伤组织、芽组织、根组织的诱导，最后简析了组培繁殖方法，列举相关研究中还存在的问题。 关键词：杉木；组织培养；繁殖技术 中图分类号： S791.27 文献标识码： A 文章编号： 1674-0432（2013）-18-74-2 开展杉木组织培养技术研究，不仅能够降低杉木苗木成本，还能优化杉木品种，提高杉木的生产力。国内外对桉树、杨树等速生树种的优良无性系组培研究已经取得成功，这对开展杉木组培研究会有一定借鉴作用。建立杉木优良无性系组培繁殖体系，也是杉木造林的发展方向。 1 杉木生态繁殖特性 杉木，属于常绿裸子植物，是我国特有的速生商品材树种。生长迅速，树高可达30多米，胸径可达2～3米。主要分布在年平均温度为15℃～20℃，年降雨量在800～2000毫米之间的地区。杉木比较喜欢光照，对土壤要求也比较高，喜欢肥沃深厚疏松排水良好的土壤。 杉木传统繁殖以播种为主，苗木参差不齐，育苗成本过高，随着无性繁殖技术的引入，杉木组织培养克服了播种育苗的劣势，也为后来杉木繁殖方式的革新奠定了基础。 2 外植体选择与处理 2.1 外植体的种类 杉木的种类很多，在杉木组织培养中，要根据不同的生长环境，选择优良品种进行组织培养，可以作为培养的外植体还不是很多，带芽的外植体有茎尖、顶芽、根茎连接点的萌蘖，还有已经分化器官的嫩茎。单体细胞的花粉作为外植体，在一些地方也有组培成功的案例。 2.2 外植体的选择 选择不同的外植体进行诱导，对离体快速培养的侧重点是不同的，利用茎尖和顶芽作为外植体为诱导时，侧重于抑制主轴的发育，对原有茎叶生长也有抑制作用，促进腋芽的萌发，能够促进繁殖的系数。利用根茎连接点的萌蘖为外植体，因为萌蘖芽具有较强的生长能力，利于扎根。 在外植体的选择时，还要注意杉木个体不同年龄、不同生理状态和不同采集时间。因为杉木生长阶段生长旺盛程度和年龄成正比，而在生殖阶段，它们的繁殖能力却与年龄成反比。所以，在外植体采集时，不能过分追求各项性状成熟度而造成繁殖能力的缺失，这也会给组织培养带来一定难度。一般情况下，要选择外植体的杉木年龄应该在5～10年之间，既保证了各项性状的成熟度，又有较强的繁殖能力，确保组织培养的高质量。 选择外植体进行组织培养，还要注意时间的选择，这对培养的成功与否也有很大的影响，一般选择夏秋季节进行，要尽量避开冬春季节。 2.3 外植体的处理 外植体采集回来后，要进行相关处理，可以剪去全部针叶，然后再剪切成2厘米左右的带芽茎段。这些外植体带有各种细菌，还要进行相关清洗和消毒杀菌。可以用洗洁精洗涤，然后用75%酒精和0.1%HgCl2进行灭菌。 3 杉木组织培养方法研究 早期的杉木组织培养主要是对培养基和其激素水平进行探究，随着研究的不断深入，逐渐转移到各种激素的不同浓度配比关系对组织培养诱导、增殖、复壮等机理的研究方面。 3.1 愈伤组织的诱导 杉木外植体在脱离母株之后，通常情况下要形成一定的愈伤组织，然后才能形成芽和根。适于诱导杉木外植体形成愈伤组织的培养基有很多，其中应用最为普遍的是1/2MS复配BA0.5 毫克/升，再加上2，4-D0.5～2.0 毫克/升。通过这个复配的培养基诱导杉木茎尖、顶芽和茎段，所产生的愈伤效果最好。在培养基中，2，4-D的浓度是一个重要因子。因为2，4-D能够引起脱分化和未组织化细胞的生长，在2，4-D含量较低的情况下，可以形成的愈伤组织大小适当。相反，在2，4-D浓度较高时，培养过程中形成的愈伤组织就会膨大突起，抑制了茎芽的诱导生长。 与此同时，愈伤组织的诱导培养还适合在黑暗的环境中进行，所以，在进行愈伤组织培养时，要尽量选择黑暗的环境。 3.2 芽组织的诱导 在杉木组织培养繁殖过程中，芽组织的诱导应该是比较简单的环节。在MS和1/2MS培养基中，只要加入0.2～0.5 毫克/升的生长素和0.5毫克/升的激动素，就可以诱导出大批的不定芽，在生长旺盛的情况下，还可以形成苗茎。这说明不同浓度的生长素和激动素的配合，对不定芽的诱导和苗梢生长有重要影响。因为在诱导过程中，生长素的作用是促进生长的，而激动素的作用是促进不定芽的形成和分化的，二者配合浓度直接影响芽组织培养的方向。浓度配合适当，有助于促进芽组织的生长和分化。目前市面上应用广泛的生长素有IBA、IAA、NAA等型号，都可以选用。 3.3 根组织的诱导 在杉木组织培养中，根组织的诱导要比芽诱导困难一些，诱导外植体生根比较不容易。在添加20克/升蔗糖的1/2MS培养基中，+NAA或者IBA0.25～0.5毫克/升生长素，也可以采用+IBA0.5毫克/升+ IAA0.5毫克/升