冰冻切片弹性纤维(ELASTIC)马森(MASSON)染色试剂.docVIP

冰冻切片弹性纤维(ELASTIC)马森(MASSON)染色试剂.doc

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冰冻切片弹性纤维(ELASTIC)马森(MASSON)染色试剂.doc

冰冻切片弹性纤维(ELASTIC)马森马森使伟郝夫Verhoeff)苏木素以及三色染料(trichrome),分析和区分冰冻组织切片中的弹性纤维的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。广泛用于结缔组织、肌肉组织和纤维蛋白的研究等。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。 技术背景 弹性纤维(elastic fiber),又称为黄色纤维(yellow fiber),是固有结缔组织Connective tissue proper)细胞外基质的成分之一,由平滑肌细胞和成纤维细胞原纤维蛋白fibrillin;FBN牙周韧带periodontal ligament)、脂肪组织中。弹性纤维缺失导致皮肤松弛症cutis laxa)、威廉姆斯综合征Williams Syndrome)等疾病。基于摩罗利 (mallory)首次应用三色系统的方法,马森(masson)进行了改良,在三色复合染料体系中,使用苯胺篮(aniline blue)替代绿篮。伟郝夫Verhoeff)苏木素选择性染色弹性纤维,三色复合染料肌肉、胶原纤维、纤维蛋白(fibrin)等组织成分。马森 产品内容 清理液(Reagent A) 200毫升 固着液(Reagent B) 10毫升 韦格液(Reagent C) 100毫升 祛色液(Reagent D) 20毫升 岑克 样品固着处理 准备好微米厚的冰冻切片小心加上200微升清理液(Reagent )在切片上,铺满整个切片样品表面 室温下孵育分钟 小心移去切片上的清理液(Reagent )小心加上200微升液(Reagent )在切片上,铺满整个切片样品表面 室温下孵育5分钟 小心移去切片上的液(Reagent )小心加上200微升清理液(Reagent )在切片上,铺满整个切片样品表面 室温下孵育分钟小心移去切片上的清理液(Reagent )样本染色处理 操作一:标准染色 小心加入升液(Reagent )在切片上,铺满整个切片样品表面 放进60℃恒温培养箱孵育60分钟 小心移去液(Reagent ) 室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent )中孵育2分钟 小心移去切片上的清理液(Reagent ) 小心加入升液(Reagent )在切片上,铺满整个切片样品表面孵育分钟小心移去液(Reagent )室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent )中孵育2分钟 小心移去切片上的清理液(Reagent )小心加入升岑克液(Reagent )在切片上,铺满整个切片样品表面 放进60℃恒温培养箱孵育60分钟 小心移去岑克液(Reagent )室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent )中孵育2分钟 小心移去切片上的清理液(Reagent )小心加入升液(Reagent )在切片上,铺满整个切片样品表面 孵育0分钟 小心移去液(Reagent ) 室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent )中孵育2分钟 小心移去切片上的清理液(Reagent )小心加入升液(Reagent )在切片上,铺满整个切片样品表面孵育分钟小心移去液(Reagent )室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent )中孵育2分钟 小心移去切片上的清理液(Reagent ) 小心加入200微升比氏液(Reagent )在切片上,铺满整个切片样品表面 室温下孵育5分钟(注意:可以延长至15分钟,增强染色效果) 小心移去比氏液(Reagent ) 小心加入200微升清理液(Reagent )在切片上,铺满整个切片样品表面 小心移去切片上的清理液(Reagent ) 重复实验步骤至二次 小心加入200微升酸性液(Reagent )在切片上,铺满整个切片样品表面(注意:可以孵育15分钟,增强染色效果) 小心移去切片上的酸性液(Reagent ) 小心加上200微升 染色液(Reagent )在切片上,铺满整个切片样品表面 室温下孵育5分钟,避免光照(注意:可以延长至15分钟,增强染色效果) 小心移去切片上的染色液(Reagent ) 小心加上200微升 修正液(Reagent )在切片上,铺满整个切片样品表面 室温下孵育2分钟 小心移去切片上的修正液(Reagent ) 室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent )中孵育2分钟 小心移去切片上的清理液(Reagent ) (选择步骤)小心加上200微升脱水液(Reagent )在切片上,铺满整个切片样品表面(注意:如果比氏液(Reagent )染色过深,建议使用由此步骤开始的选择步骤,并快速

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