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学 院： 农学院 专 业： 农产品质量与安全 年 级： 12级 学 号： 1209010375 学生姓名： 杨 雨 婷 指导教师： 尹 显 慧 2015年7月 12日 实验一：植物源杀菌植物的调查与采集 一、实验目的：对植物源杀菌植物进行市场调查，并采集部分做下一步实验研究。 二、实验原理：有的植物能分泌杀菌素，并具有杀菌作用，有些绿色植物同时对细菌、真菌具有抑制或杀死功能；利用这一功能栽植适当的绿化植物，可使大气中细菌数量下降。一方面绿化地区空气中灰尘 减少，细菌失去滋生的场所，从而使细菌数量下降；另一方面植物的分泌物本身具有杀菌作用。已经发现许多植物能分泌出具有杀死细菌、真菌和原生动物能力的挥发物质HouttuyniacordataThunb.)为三白草科蕺菜属草本植物，药理作用广泛，对多种病原菌有抑制和杀灭作用，临床主要用于病毒感染引起的各种呼吸系统感染，还具有镇痛、抗菌、抗肿瘤、抗衰老、增强机体免疫等功效。 实验条件 原料：鱼腥草 溶剂：乙醇 仪器：旋转蒸发仪，粉碎机，天平，锥形瓶，研钵 实验步骤 将新鲜的鱼腥草洗净烘干表面水分，称取叶片和地下部各5g，总共10g，研磨粉碎后置于250ml锥形瓶内，按液料比1:20（g/ml）加入无水乙醇[5]，封口震荡提取4小时，低温静置20小时后抽滤，旋转蒸发，浓缩定容至10ml（液料比1:1（g/ml），即100%原液），放入冰箱配用。 实验三：植物源杀菌植物对稻瘟病的防治效果 一、实验目的：研究鱼腥草叶片以及地下部，各称取5g用无水乙醇提取法提取的粗提取物，对稻瘟病的防治效果，参考有关文献采用料液比1:20（g/ml），70℃条件下进行旋转蒸发浓缩至10ml；在实验室条件下，采用菌丝生长速率法测定鱼腥草乙醇粗提取物对稻瘟病的最小抑菌浓度为0.8g/ml，并且根据抑制生长率计算出EC50为0.039g/ml。 二、实验条件 实验原料：鱼腥草 供试菌种：稻瘟病菌 实验器材：灭菌打孔器、接种针、小烧杯、移液枪、培养皿、酒精灯、锥形瓶、超净工作台、恒温培养箱、电子天平、保鲜膜。 实验步骤 1、PDA培养基的制备 把马铃薯洗净去皮，称取200g切成小块，加去离子水1000ml，煮沸30min后过滤，在滤液中加入10g琼脂，煮沸溶解后加入葡萄糖20g，分装在锥形瓶中，灭菌备用。 2、对稻瘟病的防效测定 供试稻瘟病菌在PDA培养基上生长10天后,用直径5mm的打孔器沿菌落边缘打取菌饼,分别接种到含0、、、、、g/mL原液的PDA平板上,每浓度3个重复放入恒温培养箱27℃条件下培养3天后用米字交叉法测量菌落直径后每天测量一次[6-7]，到第11天为止，计算抑菌率。(%)=[(对照菌落直径-菌饼直径)-(处理菌落直径-菌饼直径)]/(对照菌落直径-菌饼直径)×100 3、最小抑菌浓度的测定。0．0、0．、0．0．g/ml)，以最小或没有抑菌圈的稀释液最低浓度为最小抑菌浓度(MIC)。 4、鱼腥草乙醇粗提取物防治稻瘟病的EC50测定 根据抑制生长率，以原液稀释处理浓度的对数值作为横坐标，抑制生长率的几率值为纵坐标，绘制毒力回归直线，计算鱼腥草乙醇粗提取物的EC50。 四、实验结果与分析 1、鱼腥草乙醇粗提取物对稻瘟病的抑制效果 在实验室条件下，用生长速率法测定了鱼腥草乙醇粗提取物对稻瘟病菌菌丝的生长的抑制作用，稻瘟病菌10天菌饼生长情况见图1，2，3所示，结果在含不同浓度药液的供试培养基上生长的稻瘟病菌丝受到不同程度的抑制如表1所示。 图1稻瘟病生长折线图 图2稻瘟病生长柱状图 图3稻瘟病生长情况 表1鱼腥草乙醇粗提取物对稻瘟病的抑制作用 原液含量（g/ml） 稻瘟病菌落平均直径（cm） 抑制生长率（%） 0（CK） 2.13 — 0.005 1.97 9.82 0.01 1.71 25.77 0.02 1.41 44.17 0.04 1.16 59.51 0.08 0 100 2、鱼腥草乙醇粗提取物对稻瘟病的最小抑菌浓度测定 用分别含有不同浓度鱼腥草乙醇粗提取物的培养基，进行了稻瘟病的抑菌试验，结果见表2。由表2可知，鱼腥草乙