细胞培养试剂配制及分装.docVIP

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细胞培养试剂配制及分装

1.PBS缓冲液(PH7.4): 配1000ml,过滤(或高压消毒)分装于100ml螺口瓶,贴壁细胞传代用(1瓶/组,备用2瓶 )。 量(g/L) NaCl KCl Na2HPO4.12H2O KH2PO4 1000 ml 8.0 0.2 3.14 0.2 2.D-Hanks液 配1000ml,取100ml用于配贴壁细胞消化液,留取约200 ml备用 量(g/L) NaCl KCl Na2HPO4.12H2O KH2PO4 NaHCO3 1000ml 8.0 0.4 0.06 0.06 0.35 3.消化液:0.25%胰酶+0.02%EDTA 配100ml ,过滤于100ml瓶,用15ml离心管分装成8管,1管/组,约12ml,用于贴壁细胞实验。 4.0.5%台盘兰 取0.5克台盘兰溶于100 ml PBS中,用于细胞记数。 5.细胞冻存液:(临用前配制) 取18 ml含10%小牛血清细胞培养液,2 ml DMSO原液 (DMSO终浓度10%,血清终浓度8-9%)2管/组,8组总计16管,16 ml。 6. MTT:5mg/ml 200mg MTT溶于40 ml PBS中,配制成5mg/ml浓度,过滤除菌后1.5mlEP管分装成8管,1ml/组。 7.分装1640、小牛血清 根据实验需要配制成含10%或15%小牛血清的1640培养液 8. DMSO分装 4-6ml/组(15ml离心管) (用于配冻存液和MTT法)5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-F)注射液用无菌生理盐水配制成0 μg/ mL溶液,使用前稀释至所需浓度。

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