荧光法测定 ZnSCN-罗丹明B 中Zn 的含量.docVIP

荧光法测定Zn-SCN-罗丹明B体系中Zn2+ 的含量 施宗友（四川省攀枝花市产品质量监督检验所 攀枝花 617000） 摘要荧光分光光度关键词荧光分光光度法 名称 型号 特性 生产单位 荧光光度计 970CRT 150W灯 上海三科仪器有限公司 电热恒温水浴箱 WSZ-133-65 220V/500W 上海医疗器械五厂 电子天平 BS110S Max=110g d=0.1mg 北京赛多利斯仪器有限公司 电子万用炉 MD-2 220V/1000W 北京市永光明医疗仪器厂 超声波清洗器 KQ-500B 220V/50HZ 清洗容量：22.5L 工作频率：40KHZ 江苏昆山市淀山湖镇 2.2 化学试剂 表2-2 化学试剂一览表 名称 分子式 分子量 含量 生产单位 罗丹明B C28H31C1N2O3 479.28 / 天津医疗工业技术研究所 锌粒（分析纯） Zn 65.38 ≥99.5% 西安未央精细化工厂 硫氰酸钾（分析纯） KSCN 97.18 ≥98.5% 天津市百世化工有限公司 硫酸（优级纯） H2SO4 98.08 95%～98% 白银化学试剂厂 2.3 溶液的配制 2.3.1 锌标准工作液（1.00μg/mL） 准确称取1.00 g 纯锌溶于10mL盐酸中，待反应完全将溶液移至1000mL 容量瓶中，用蒸馏水定容，摇匀，备用。用2mL移液管量取1mL 锌标准储备液于1000mL容量瓶中，用蒸馏水定容，摇匀待用。 2.3.2 罗丹明B溶液的配制（1.16×10-4mol/L） 准确称取0.0056g罗丹明B，用蒸馏水配制成100mL的水溶液，即为1.16×10-4mol/L的罗丹明B溶液。 2.3.3 KSCN标准工作液（0.10 mol/L） 称取2.4295g KSCN，用蒸馏水配制成250mL的溶液，即为浓度为0.10 mol/L的KSCN标准工作液。 2.3.4 H2SO4标准工作液（0.05 mol/L） 用移液管吸取0.7mL 96% 的H2SO4于250mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度即可。 2.4 实验条件的选择 2.4.1 激发波长和发射波长的确定 根据实验方案，在970CRT 荧光光度计上扫描其激发光谱和发射光谱图，该荧光配合物的激发波长和发射波长分别为560nm和586nm。因此，选择激发波长为560 nm和发射波长为586 nm，同时调节EX缝宽和EM缝宽分别为10nm、10nm，灵敏度选择第一档。 2.4.2 显色剂用量的选择 按实验方案，考察显色剂用量的影响，实验结果见下表： 表2-3 显色剂用量的影响 序号 1 2 3 4 5 6 7 罗丹明B用量(mL) 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 荧光强度 308.413 454.289 546.913 574.632 566.406 536.734 508.23 实验结果表明，1.16×10-4mol/L的罗丹明B 在1.5～3.0mL时荧光值较稳定，因此适宜用量范围为1.5～3.0mL，且在2.0 mL时荧光强度最大，实验选择最佳用量为2.0 mL。 2.4.3酸度的影响 按实验方案，在其它用量一定的情况下，改变H2SO4 用量，从而确定最佳用量，实验结果见下表： 表2-4 H2SO4 用量的确定 序号 1 2 3 4 5 6 7 H2SO4用量(mL) 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 相对荧光强度 17.841 36.373 26.382 44.036 28.215 23.498 28.411 图2-1 酸度的影响 由图2-1可知：0.05mol/L H2SO4 用量在2.0 mL时其相对荧光强度最大，故本实验选择H2SO4 用量为2.0mL。 2.4.4 KSCN用量的确定 按实验方案，改变KSCN用量操作，结果见下表： 表2-5 KSCN用量的选择 序号 1 2 3 4 5 6 7 KSCN用量（mL） 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 相对荧光强度 40.85 45.821 48.001 49.654 44.458 40.031 30.465 图2-2 KSCN用量的影响 由图2-2可知：KSCN用量在3.5mL时，相对荧光强度最大，选择KSCN最佳用量为3.5mL。 2.4.5温度的影响 表2-6温度的影响 序号 1 2 3 4 5 6 7 温度（℃） 20 30 40 50 60 70 90 荧光强度 579.853 553.456 529.531 497.856 456.611 420.968 398.754