仪器分析笔记《高效液相色谱分析》剖析.docVIP

第二章 高效液相色谱分析 §2.1 高效液相色谱法概述（掌握） 2.1.1 高效液相色谱法的特点 1、与经典液相色谱法比较 2、与气相色谱法比较 3、高效液相色谱法的发展 A、固定相的变化 填料粒度减小，粒型规整；键合型固定相；整体结构1.0μm填料的超高压液相色谱。 B、流动相变化 目前，出现120220℃超热水为流动相、FID和FPD检测器的HPLC。 C、全新方法 剪切流路液相色谱；不同分离机制组合的多维液相色HPLC与MS、NMR、IR联用的多维液相色谱法。 4、高效液相色谱法的特点 ①高压 ：采用高压输液设备，（150~350）× 105 Pa ②高速：分析速度快； ③高效：柱效很高。（n30000），可以在数分钟内完成数百种物质的分离 ④高灵敏度：10—9g（UV）；10—11g （荧光检测）。 5、高效液相色谱法的局限 ①溶剂用量太大； ②缺乏诸如气相色谱使用的TCD、FID通用型检测器； ③不能替代气相色谱法，难分离化合物(柱效10万以上)，必须使用毛细管气相色谱法进行分离； ④不能替代中、低压柱色谱法，一些生物活性化合物不能承受200kPa～1MPa压力。 §2.2 影响色谱峰扩展及色谱分离的因素（了解） 2.2.1 影响色谱峰的扩展的因素 高效液相色谱法的基本概念及理论基础，与气相色谱法是基本一致的，其区别主要在于流动相的不同。