大肠杆菌O157免疫磁珠分离检测试剂盒说明书（草案）.docVIP

志贺氏菌免疫磁珠分离检测试剂盒说明书 【产品名称】 通用名称：志贺氏菌免疫磁珠分离检测试剂盒 英文名称：Immunomagnetic separation IMS Kit for Shigella 【包装规格】 30次/盒 【预期用途】 用于食品、饮用水、粪便以及环境样品中的志贺氏菌的分离检测，具有快速、灵敏的特点。 【检验原理】 本试剂盒所提供的免疫磁珠表面偶联有志贺氏菌的特异抗体，可与样本中的志贺氏菌的表面抗原进行特异性结合，磁珠在磁场作用下与样本中的其它物质快速分离，从而达到分离检测志贺氏菌的目的。 【主要组成部分】 志贺氏菌免疫磁珠分离检测试剂盒 组 份 规 格 数 量 贮存温度 志贺氏菌免疫磁珠 2.ml/瓶 1瓶 2~8℃ 洗脱缓冲液 0ml/瓶 1瓶 【储藏条件及有效期】 志贺氏菌免疫磁珠和洗脱缓冲液请置于2~8℃保存，有效期12个月。 【适用仪器】 磁力分选仪或磁力架和旋转混合器 自备物品：摇床，培养箱，漩涡振荡器；最大量程1000μl、100μl、10μl的微量移液器，1000μl、200μl灭菌带滤芯吸头；10μl灭菌吸头；GN培养液，HE培养基；1.5ml灭菌离心管，均质袋，接种针。 【使用方法】 1、称取25g待检样品，用均质袋进行均质后转入225ml GN培养液中，摇匀。 2、向上述培养基中加入25μl 新生霉素 4.5mg/ml ，摇匀。 3、将培养基放入恒温培养箱进行培养，42℃培养6h）至菌浓达到103cfu/ml以上。 4、从培养箱中取出摇瓶，另取一支无菌1.5ml离心管，加入1ml增菌液。 5、取出志贺氏菌免疫磁珠，在漩涡振荡器上振荡10s至磁珠全部重悬。 注:操作者如使用磁力架进行手动免疫磁珠分离，按以下步骤进行操作；如采用自动磁珠分选仪则按照仪器说明书进行操作，之后转第9步继续实验。 6、吸取μl志贺氏菌免疫磁珠加入到含有1ml增菌液的离心管中，颠倒混合后将离心管夹在微量混合器上，旋转混合15min。 7、取下离心管，放入磁力架的孔中，静置3min，小心吸走管中的液体。 8、取1ml洗脱缓冲液（使用前请将试剂恢复至室温）重悬磁珠，将离心管颠倒混匀5-8次，再置于磁力架中，静置3min，小心吸走多余液体。重复洗涤一次，最后加入20-50μl洗脱缓冲液重悬磁珠。 注:如检测样品为冻肉或者粪便样品时，增菌液中可能会含有大量脂肪颗粒等残渣残留在管壁上，建议操作者在加入洗脱缓冲液重悬磁珠后将体系转换至新的离心管中再进行洗涤，以减少杂菌残留。 9、将磁珠全部吸出在HE培养基上涂布划线培养（先将磁珠涂布在培养基的一半区域，再用接种针进行划线），37℃培养箱培养18-24h。 10、观察HE培养基上的菌落生长情况，无色或浅绿色菌落为志贺氏菌。 11、如HE培养基上有无色或浅绿色菌落生长，挑取5个菌落（不足5个则全部挑取）进行一步验证。 【注意事项】 请严格按照说明书操作，避免样品交叉污染，所有实验步骤均需戴手套。 试剂盒应按含有传染性材料对待。 本试剂盒仅用于体外试验。 试剂使用前应恢复至室温。 【生产企业】 天津生物芯片技术有限责任公司 天津经济技术开发区宏达街23号一区 邮编：300457 网址： 电话：（022）座机电话号码 传真：（022）座机电话号码 Cat.No.IMS002-1 第2 页 网址： 电话：座机电话号码