可食性动物组织中卡巴氧残留标示物ELISA检测方法的建立.docVIP

可食性动物组织中卡巴氧残留标示物ELISA检测方法的建立 　　摘要：将卡巴氧残留标示物喹喔啉-2-羧酸（QCA）与γ-氨基丁酸（ABA）衍生成喹喔啉-2-甲酰胺丁酸（QCA-ABA），再与牛血清白蛋白（BSA）偶联作为免疫原（QCA-ABA-BSA），将QCA与卵清白蛋白（OVA） 偶联作为包被原（QCA-OVA），建立了猪可食性组织中QCA的间接竞争ELISA检测方法。结果表明，最优的QCA-OVA包被抗原浓度为4 μg/mL，抗体稀释倍数为1∶3.2×104，最适检测范围为0.2～51.2 ng/mL，最低检测限为0.6 μg/kg，对猪肌肉和猪肝脏的添加回收率为47.4%～87.7%。 　　关键词：卡巴氧；喹喔啉-2-羧酸；ELISA；残留检测 　　中图分类号：TS251.7 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）01-0193-04 　　Development of an ELISA Method for Screening of Marker Residue of Carbadox in Animal Edible Tissues 　　ZHANG Ze-ying1，YUAN Zong-hui2 　　（1.Department of Food Engineering， Wuhan Bioengineering Institute， Wuhan 430015， China； 　　2.Ministry of Agriculture Key Laboratory of Food Safety Evaluation， Wuhan 430070， China） 　　Abstract： Derivatized quinoxaline-2-carboxylic acids a marker residue of carbadox with γ-amino butyric acid（ABA）， was conjugated to BSA to prepare immunogen（QCA-ABA-BSA）， and QCA was conjugated to OVA to prepare coating antigen（QCA-OVA）. Indirect competitive ELISA for QCA derivatizative （QCA-ABA） was established to determine QCA in pig edible tissues. The results of the experiment demonstrated that the optimal concentration of the coating antigen， dilution multiple of polyclonal antibody against QCA-ABA were 4 μg/mL， 1∶3.2×104， respectively. The standard curve of indirect competitive ELISA is also established. The curve has a favorable linearity relation within the concentration range of 0.2～51.2 ng/mL， indicaing that the lowest detection limit is 0.6 μg/kg， with the recovery rate of 47.4%～87.7% in swine muscle and liver tissues. 　　Key words： carbadox； QCA； ELISA； residue determination 　　收稿日期：2013-09-29 　　基金项目：上海市科技兴农计划项目（沪农科攻字2003B99） 　　作者简介：张泽英（1980-），女，四川泸州人，讲师，硕士，主要从事食品分析检测工作，（电话）027电子信箱； 　　通讯作者，袁宗辉，教授，博士生导师，（电子信箱）zonghui55@163.com。 　　卡巴氧于1999年被欧盟列为禁用药，随后许多国家也出台了相应的法规限制该药的使用。然而，由卡巴氧残留引发的食品安全问题仍时有发生。目前，大量出口到欧盟等国的可食性动物组织主要是利用色谱方法，如LC-UV[1，2]、GC-MS[3]和LC-MS-MS[4-7]监测卡巴氧及其代谢物的残留，这些技术耗时、耗力，并且需要大量资金，不适合高通量筛选，因此很有必要开发一种快速、低廉的高通量筛选方法来满足卡巴氧残留监测的