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仪器分析法—紫外可见分光光度法 Contents： 4.无机化合物的紫外-可见吸收光谱 主要有两种方式： （1）电荷迁移跃迁 电荷在配合物的中心离子与配位体之间进行跃迁（及配合物内在的氧化还原反应）。 （2）配位场跃迁 对于过渡金属元素而言，核外层的电子可以在不同的能级轨道间跃迁，如f-f;d-d跃迁。 5.影响紫外—可见吸收光谱的因素 影响：谱带位移；谱带强度的变化等。 谱带位移：表现为物质的最大吸收波长发生移动，包括有红移和蓝移。 谱带强度的变化：包括增色效应（吸收强度增加）与减色效应（吸收强度减小）。 影响的因素： （1）共轭效应的影响 A：π电子共轭体系增大，最大吸收波长红移，吸收强度也增加。这是由于共轭效应，使得电子离域到多个原子之间，导致π-π*跃迁能量降低。同时跃迁的几率也增大，则吸收强度也随之增大。 B 空间阻碍使共轭体系破坏，最大吸收波长蓝移，吸收强度减小。 （2）取代基的影响 （3）溶剂的影响 A 溶剂的极性不同往往会引起某些化合物吸收光谱的红移或蓝移。 B 溶剂的酸度影响 对于具有酸碱性的被测物质，溶剂的pH变化，则溶质的存在形式也发生变化，使分子中共轭效应发生改变，则使吸收红移或蓝移。 C 极限波长 作为溶剂，在远紫外区都有吸收，而测量通常是在近紫外和可见区，所以溶剂的吸收对溶质不产生影响，但如果测定是在溶剂的极限波长以下，则溶剂本身的吸收将影响测定。因此，测定只能在溶剂的极限波长以上进行。 ·生成的有色配合物稳定性好 即要求配合物有较大的稳定常数，有色配合物不易受外界环境条件的影响，亦不受溶液中其它化学因素的影响。有较好的重现性，结果才准确 ·色差大 有色配合物与显色剂之间的颜色差别要大，这样试剂空白小，显色时颜色变化才明显。 Thank You! 解： A - lgT - lg0.645 0.190（三位有效数字） c 500 ?g · L-1 5.00×10-4 g · L-1 b 2cm ② ① 定量分析时，通常液层厚度是相同的，按照比尔定律，浓度与吸光度之间的关系应该是一条通过直角坐标原点的直线。但在实际工作中，往往会偏离线性而发生弯曲。若在弯曲部分进行定量，将产生较大的测定误差 二 偏离朗伯一比尔定律的因素 朗伯一比尔定律只对一定波长的单色光才能成立，但在实际工作中，即使质量较好的分光光度计所得的入射光，仍然具有一定波长范围的波带宽度。在这种情况下，吸光度与浓度并不完全成直线关系，因而导致了对朗伯一比尔定律的偏离。所得入射光的波长范围越窄，即“单色光”越纯，则偏离越小。 （一）非单色光所引起的偏离 （二）非吸收作用引起的偏离 非吸收作用引起的对朗伯一比尔定律的偏离，主要有散射效应和荧光效应，一般情况下荧光效应对分光光度法产生的影响较小。 散射效应：朗伯一比尔定律只适用于十分均匀的吸收体系。当待测液的体系不是很均匀时，入射光通过待测液后将产生光的散射而损失，导致吸收体系的透过率减小，造成实测吸光值增加 朗伯—比尔定律是建立在均匀、非散射的溶液这个基础上的。如果介质不均匀，呈胶体、乳浊、悬浮状态，则入射光除了被吸收外，还会有反射、散射的损失，因而实际测得的吸光度增大，导致对朗伯—比尔定律的偏离 荧光效应: 当入射光通过待测液，若吸光物质分子吸收辐射能后所产生的激发态分子以发射辐射能的方式回到基态而发射荧光，结果必然使待测液的透光率相对增大，造成实测吸光值减小。 溶质的离解、缔合、互变异构及化学变化也会引起偏离。其中有色化合物的离解是偏离朗伯—比尔定律的主要化学因素。例如，显色剂KSCN与Fe3+形成红色配合物Fe SCN 3，存在下列平衡： Fe SCN 3 Fe3++3SCN－ （三）化学反应引起的偏离 溶液稀释时，上述平衡向右，离解度增大。所以当溶液体积增大一倍时，Fe SCN 3的浓度不止降低一半，故吸光度降低一半以上，导致偏离朗伯—比尔定律。 2.3 紫外—可见分光光度计 UV-Vis Spectrophotometers 一、基本组成 general process 光源 单色器 样品室 检测器 显示 1. 光源 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500 nm。 紫外区：氢、氘灯。发射180～375 nm的连续光谱。 2.单色器 将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长单色光的光学系统。 ①入射狭缝：光源的光由此进入单色器； ②准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束 ③色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅 ④聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝； ⑤出射狭缝。 3.样