细菌革兰氏染色作业指导书重点.docVIP

标题：细菌革兰氏染色作业指导书 版本号：A 修订号：0 文件编号：SMXGKYY -SOP-001 发布日期：2015年04月01日 生效日期：2015年04月01日 发布部门：质量管理小组 编制人： 审核人： 批准人（签字）： 革兰氏染色 目的 更好的观察细菌形态，并可按染色反应加以分类鉴别。 原理 化学学说：碘液在菌体内与结晶紫结合后又和菌体内的核糖核酸镁盐—蛋白质复合物结合，此结合物不易被95%乙醇脱掉，呈革兰氏染色阳性。因革兰氏阴性菌缺乏核糖核酸镁盐，故对碘与结晶紫结合物摄取少，且不牢固，易被乙醇脱色，而呈革兰氏染色阴性。 等电点学说：革兰氏阳性菌的等电点在PH2—3，比阴性菌（PH4—5）更低。加之碘为弱氧化剂，可降低革兰氏阳性菌的等电点，使两类菌的等电点差异扩大。因此，阳性菌和碱性染料的结合力比阴性菌更强。 渗透性学说：阳性菌含粘肽多、糖多，酒精使其脱水而致细胞壁间隙缩小，通透性降低，在菌体内保留了染料—碘复合物，故呈紫色。阴性菌胞壁含粘肽少，通透性不受影响，菌体内染料—碘复合物较易透出，失去紫色，被复染成为红色。 标本 痰涂片、分泌物涂片、细菌涂片等。 染液 第一液：结晶紫乙醇饱和液（2g结晶紫溶于95%乙醇20ml内）+10g/l草酸铵水溶液80ml混匀。 第二液：碘1g，碘化钾2g，加少许蒸馏水，充分振摇，溶解后加蒸馏水至300m