上海交通大学微生物知识整理分析.doc

本资料由09级资源与环境科学班荣誉出品~~ 前言：首先，这份资料虽然囊括了考试的大部分内容，但仍有出入，仅作参考。并且每个人的整理方式不同，因此有些地方还需要同学们自己好好地看书、看PPT而更好地掌握。最后，感谢潘劼皓（1）、陈瑞（2）、姜萍和俞艳（3）、刘潇和赵征慧（4）、汪刚（5）、凌然（6）、李蓝青和欧阳矜盈（7）、沈春伟（8）、邱宇（12）、陈栋（14）同学参与本次整理。 祝大家考出理想的成绩~~ 第一章：绪论 微生物学：microbiology 一般定义为研究肉眼难以看清的称之为微生物的生命活动（一定条件下的形态结构、生理生化、遗传变异、以及微生物的进化、分类、生态等规律及其应用）的科学。 微生物特点：个体小、繁殖快、分布广。 巴斯德的主要贡献：1）彻底否定了“自生说” 2）免疫学——预防接种（鸡霍乱病） 3）证实发酵是由微生物引起的 4）巴斯德消毒法和家蚕软化病的解决 柯赫的主要贡献： 1）病原细菌的研究：①证实了炭疽病毒是炭疽病的病原菌 ②发现肺结核病的病原菌 ③提出了证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则——柯赫原则 柯赫原则：ⅰ在每一相同病例中都出现这种微生物 ⅱ要从寄主分离出这样的微生物并在培养基中培养出来 ⅲ用这种微生物的纯培养接种健康而敏感的寄主，同样的疾病会反复发生 ⅳ从试验发病的寄主中能再度分离培养出这种微生物来 2）微生物基本操作技术方面：①用固体培养基分离纯化微生物的技术 ②配制培养基 微生物生命现象的特性和共性可概括为：①微生物具有其它生物不具有的生物学特性 ②微生物具有其它生物共有的基本生物学特性 ③易操作性 第二章：微生物的纯培养和显微技术 2.1 微生物的分离和纯培养 无菌技术 aseptic technique 在分离、转接及培养纯培养物时防止其他微生物污染，其自身也不污染操作环境的技术，它是保证微生物学研究正常进行的关键。 培养基 culture medium 培养微生物的营养物质，根据其中固化剂含量的不同可分为固体、半固体、液体三种。 接种操作： a 接种环在火焰上灼烧灭菌； b 烧红的接种环在空气中冷却，同时打开装有培养物的试管； c 用接种环蘸取一环培养物转移到一装有无菌培养基的试管中，并将试管重新盖好； d 接种环在火焰上灼烧，杀灭残留的培养物。 菌落 colony 分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。 菌苔 lawn 固体培养基表面众多菌落连成一片时所形成的微生物生长群体。 纯培养物 pure culture ? 由一种微生物组成的细胞群体，通常是由一个单细胞生长、繁殖所形成。 培养平板 culture plate 常简称为平板，是冷却凝固后的固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面。被用以获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式。 涂布平板法 spread plate method 在培养平板表面均匀涂布经过稀释的微生物悬液后，保温培养，在固体培养基表面得到生长分离的微生物菌落。 稀释倒平板法 pour plate method 将待分离的材料稀释后与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后制成可能含菌的培养平板，保温培养后分离得到的微生物菌落生长在固体培养基表面和里面。 平板划线法 streak plate method 用接种环在培养平板表面划线接种微生物，使微生物细胞数量随着划线次数的增加而减少，并逐步分开。保温培养后，在固体培养基表面得到生长分离的微生物菌落。 稀释摇管法 shake tube method 将待分离的材料稀释后与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后用石蜡封盖，保温培养后分离得到的微生物菌落生长在琼脂柱中间。 单细胞（孢子）分离 采用显微操作技术直接挑取微生物的单细胞 孢子 ，培养后获得纯培养物。 富集培养 利用不同微生物间生命活动特点的不同，制定特定的环境条件，使仅适应于该条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，从自然界中分离到所需的特定微生物。 微生物的保藏技术：传代培养保藏、冷冻保藏、干燥保藏法。 2.2 显微镜和显微技术 略（实验课讲解普通光学显微镜，其他显微镜的有关内容略） 简单染色法 正染色 革兰氏染色法 死菌 鉴别染色法 抗酸性染色法 细菌染色法 负染色：荚膜染色法 芽孢染色法 活菌：用美蓝或TTC 姬姆萨染色法 超薄切片技术：取样 固定 脱水 浸透与包埋 切片 捞片 染色 观察 2.3 显微镜下的微生物 细胞型微生物 凡具有细胞形态的微生物。按系统发育和细胞结构分为细菌 Bacteria 、古生菌 Archaea 和