石榴果皮褐变实验方案16-2-23.docVIP

果皮褐变指数 果皮失重率和平均散失速率的测定 失重率采用称量法，每个样品50g,重复称量3次，取其平均值。 失重率（%）=（不同时间样品质量-样品初质量）/样品初质量× 100% 平均散失速率（%/d）=失重率/存放时间；其中%为散失百分率；d 为存放时间（d） 1.‘玉石籽’褐变过程中酶促褐变相关酶活性的变化 褐变过程中PPO，POD等活性变化。 PPO酶活性测定方法 石榴果皮PPO酶液的提取 取石榴果皮0.5g，置于研钵中，加入5mL 4℃下预冷的pH 7.0 的磷酸缓冲液（含1%聚乙烯吡咯烷酮和10 mmol/L 的抗坏血酸）和少量石英砂，冰浴研磨成匀浆，4 下12000r.min-1 离心20min,上清液即为PPO和POD粗提液，4保存备用。 PPO活性测定参考张立华等（2007）的方法并改进，向反应管中加入2.95mlμL粗酶提取液（以煮过失活的酶液为对照），使用410nm波长处进行酶动力学分析，立即计时，扫描随后2min 内溶液在410 nm处的吸光度变化，每30s 读数一次，共记录5次，然后以每分钟内A410变化0.01为一个酶活性单位(U)。每个样品重复测定3次，取其平均值。 PPO 活性计算公式: （2）果皮过氧化物酶（POD）活性测定 采用愈创木酚比色法。 POD 活性测定参考印芳等( 2008) 的方法并改进：取上述粗酶