13第十三章免疫学检测技术研究报告.ppt

第十二章 免疫学技术 第一节、抗体的制备 一、抗血清的制备 （一）用于免疫的动物 主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等， 抗原来源与动物种属的关系：种属差异越远，免疫原性越强。 动物种类的选择：根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量。 一般制备抗血清，多用家兔和山羊，因其反应良好，能够提供足够数量的血清。 用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，雄性， 注意饲养，消除个体差异，及免疫过程中的死亡。 家兔中纯种新西兰兔最好，一组三只，兔的体重以2～3kg为宜。 （二）免疫途径 如肌肉内、皮内、皮下、静脉内、腹腔内、淋巴结内注射等， 一般用皮下或背部多点皮内注射，每点注射0.1ml左右。 途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性，如激素、酶、毒素等生物学活性抗原，一般不宜采用静脉注射。 （三）佐剂 注射抗原时加入的能增强抗原的抗原性、刺激机体产生较强免疫反应的物质，称为免疫佐剂。 佐剂的作用： 延长抗原体内存留时间 增加抗原刺激作用 刺激免疫活性细胞增多 促进T细胞与B细胞互作。 不完全福氏佐剂：羊毛脂：石腊油=1： 5，视需要可调整为1：2～9（V/V）， 福氏完全佐剂：在每毫升不完全佐剂加入1～20mg卡介苗。 配制方法： 按比例将羊毛脂与石腊油置容器内，用超声波混匀，高压灭菌，置4℃下保存。 免疫前取等容积佐剂与免疫原溶液混合，振荡器混匀成乳状，也可研磨均匀后再边