实验8化能异养微物的分离与纯化(综合).docVIP

实验8 化能异养微生物的分离与纯化(综合) [目的要求] 1．掌握细菌、放线菌、酵母苗和霉菌稀释分离、划线分离等技术。 2．学习从样品中分离、纯化出所需菌株。 3．学习并掌握平板倾注法和斜面接种技术，了解培养细菌、放线菌、酵母菌及霉菌四大类微生物的培养条件和培养时间。 4．学习平板菌落计数法。 [基本原理] 土壤是微生物生活的大本营，是寻找和发现有重要应用潜力的微生物的主要菌源。不同土样中各类微生物数量不同，一般土壤中细菌数量最多，其次为放线菌和霉菌。一般在较干燥，偏碱性、有机质丰富的土壤中放线苗数量较多；酵母菌在一般土壤中的数量较少，而在水果表皮、葡萄园、果园土中数量多些。本次实验从土壤中分离细菌、放线菌和霉菌；白面曲(发面用的引子)或酒曲或果园土中分离酵母菌。 为了分离和确保获得某种微生物的单苗落，首先要考虑制备不同稀释度的苗悬液。各类菌的稀释度因菌源、采集样品时的季节、气温等条件而异。其次，应考虑各类微生物的不同特性，避免样品中各类微生物的相互干扰。细菌或放线苗在中性或微碱性环境较多．但细菌比放线萌生长快，分离放线菌时，一般在制备土壤稀释液时添加10%酚或在分离培养基中加相应的抗生素以抑制细菌和霉菌(如加链霉素25-50μg ml以抑制细菌；添加制霉菌素50μg／ml或多菌灵30μ／ml以抑制霉菌)；酵母苗和霉菌都喜酸性环境，一般酵母菌只能以