姜黄素稳定性包合物液相色谱法药物动力学.docVIP

姜黄素稳定性包合物液相色谱法药物动力学 摘要:目的姜黄素是中药姜黄的主要活性成分，是一种黄色酸性酚类物质自古以来，作为一种食品添加剂姜黄素被广泛使用随着科学技术的进步，人们对姜黄素的认识逐步深化，发现其具有广泛的药用效果姜黄素不仅具有抗免疫缺陷病毒HIV、抗细胞畸变、抑制血小板凝集和血栓形成等作用，并且可拮抗炎性介质和细胞因子及核因子NF-kB的释放清除氧自由基，降低血和肝中的过氧化脂质能提高肝细胞匀浆抗氧化能力和超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽过氧化物酶活性，减少血液和肝脏中的多余脂肪，呈现良好的保肝效用而且能明显降低总胆固醇TC含量，增加血清高密度脂蛋白含量，降低血清低密度脂蛋白含量，使LDL-CHDL-C的比值明显降低，具有显著的降血脂作用 因此，姜黄素已成为国内外药物研究的热点但姜黄素不易溶于水，对光、热稳定性较差，体内血药浓度低，生物利用度不高基于以上原因，本课题对姜黄素的理化性质进行深入研究，将其制成微囊和包合物，从而提高药物的稳定性和水溶性，以便进一步制成制剂后应用于临床，并对姜黄素微囊和包合物的体内药物代谢动力学进行研究 方法姜黄素溶液的稳定性实验建立紫外可见分光光度法，研究温度、光线、湿度和抗氧化剂维生素C对姜黄素溶液和姜黄素药物粉末稳定性的影响，采用经典恒温法测定姜黄素溶液在室温时的有效期，并确定溶液最稳定的pH值范围 姜黄素稳定化制剂技术的研究根据有关文献报道，采用微囊技术和包合技术可以提高姜黄素的稳定性用明胶-阿拉伯胶复凝聚法将姜黄素制成微囊，用β-环糊精和羟丙基-β-环糊精以饱和水溶液法将姜黄素制成包合物，并对微囊和包合物进行稳定性实验研究，其中包括高温、高湿度和高光强的影响因素实验经过比较，筛选出符合要求的稳定化方法，以便进一步制成姜黄素的稳定制剂 β-环糊精和羟丙基-β-环糊精包合物的制备采用饱和水溶液法，将定量的β-环糊精制成饱和溶液，置于恒温磁力搅拌器中，加入姜黄素的丙酮溶液，包合2h后，将含包合物的混悬液置冰箱中冷藏24h，抽滤，固形物用无水乙醇洗涤，所得包合物在40减压干燥，即得 称取羟丙基-β-环糊精，加水溶解，置于恒温磁力搅拌器中，加入姜黄素的丙酮溶液，继续搅拌2h，将溶液自然降温，室温下静置12h，过滤，滤液冷冻干燥24h，即得疏松冻干粉末 姜黄素微囊的制备在文献和预实验的基础上初步确定姜黄素缓释微囊的制备处方，以阿拉伯胶和明胶为囊材，考察影响微囊成型的各个因素，在单因素考察的基础上通过四因素三水平的正交实验，以微囊粒径和包封率为评价指标，综合考察胶液浓度、胶药比、搅拌速度和pH值的影响，确定缓释微囊的制备工艺用光学显微镜和扫描电镜检验微囊的形成，并用光学显微镜观察其大小形态及其分布体外溶出实验研究其缓释性，采用紫外分光光度法对微囊的释放度进行检测 选用中国药典2005年版附录XD溶出度第二法桨法，转速为100r.min-1，以0.8％SDS0.1mo1.ml-1的盐酸溶液作为溶出介质，在规定的时间点内取样，并于428nm波长处测定样品溶液的吸收度A值，根据标准曲线计算药物浓度，求得累积释放百分率将释放度数据用Highchi模型、零级和一级方程进行拟合 家兔体内药代动力学实验以家兔为实验动物，采用随机分组的方法将家兔分为两组，分别口服给予姜黄素软胶囊和缓释微囊，洗脱两周后进行交叉试验，在不同时间点分别取样，血浆样品经过预处理后，采用高效液相色谱法测定姜黄素的血药浓度，测定结果用3p97药代动力学程序软件进行处理，计算各种药动学参数以Tmax、Cmax、AUC为指标综合评价姜黄素市售片和缓释微囊的相对生物利用度同时以姜黄素缓释微囊体内吸收分数Fa对其相应的体内释放百分率Fr进行回归，考察姜黄素缓释微囊的体内吸收与体外释放的相关性 同样采用随机分组的方法，将实验动物家兔分为两组，分别于耳缘静脉注射姜黄素溶液和姜黄素的羟丙基-β-环糊精包合物冻干粉，洗脱两周后进行交叉试验，在不同时间点分别取样，血浆样品经过预处理后，采用高效液相色谱法测定姜黄素的血药浓度，测定结果用3p97药代动力学程序软件进行处理，计算各种药动学参数以此为指标综合评价姜黄素包合物的相对生物利用度 结果姜黄素原料药的稳定性温度大于40时，姜黄素稳定性较差高光强情况下，其含量下降比较显著维生素C的加入可以提高姜黄素的稳定性姜黄素在中性和碱性条件下稳定性差，降低溶液pH值，可使其稳定性增强，最稳定的pH范围是2.0～4.0 姜黄素微囊和包合物的稳定性比较经过大量的实验研究发现，姜黄素微囊，β-环糊精包合物和羟丙基-β-环糊精包合物经过高温，高湿和高光强实验，比较得出，将姜黄素制备成微囊，可以完全解决姜黄素稳定性差的问题此外，该微囊还具有一定的缓释作用而制备的两种姜黄素包合物可以增加药物的溶解度，对温度的稳定性也明显优于原料