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DNA重组技术的基本工具 培育抗虫棉的关键步骤： 关键步骤一：抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二：形成重组DNA 关键步骤三：重组DNA导入受体(棉花)细胞 一、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶（简称限制酶） 1、来源：主要是从原核生物中分离纯化出来 2、种类：4000种 3、作用：识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 4、结果：形成两种末端：黏性末端和平末端 大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 黏性末端 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 平末端 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 要切两个切口，产生四个黏性末端。 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，就似乎可以合成重组的DNA分子了。 二、基因的针线──DNA连接酶 DNA连接酶连接形成磷酸二酯键 DNA连接酶和DNA聚合酶的比较 比较 DNA连接酶 DNA聚合酶 不同点 连接DNA片段 （双