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亲代传递给子代遗传物质——DNA DNA如何复制自己以保证子代得到亲代的全部遗传信息呢? 半保留型复制模型 新形成的子一代DNA分子 模板链恢复原来的双螺旋 全保留型复制模型 如何来证明哪个观点是正确的? 如何区分原来的DNA链与新合成的DNA链呢? 利用放射性同位素不断放出射线的性质,可及时、灵敏地探测追踪放射性物质; 或利用与普通同位素的质量不同进行质量分析追踪其数量变化、位置移动等。 在高中生物学中,常用的同位素有:14C/12C、18O/16O、15N/14N、32P/31P、35S/32S 将样品与适当的溶剂介质混合后离心,各种颗粒在与其等密度的介质带处形成沉降区带。 实验设计 利用与普通同位素的质量不同进行质量分析 常用的同位素: 14C/12C、18O/16O、15N/14N、32P/31P、35S/32S 实验设计 重带 中带 轻带 实验材料: 大肠杆菌、含15N的培养液、含14N的培养液、提取 DNA的各种试剂和器材、离心机、离心管 (大肠杆菌20min繁殖一代) 现代分子生物学技术: 同位素示踪技术、密度梯度离心法 实验设计 重带 中带 轻带 亲代 子一代 子二代 (轻)DNA (中)DNA (重)DNA 本实验根据试管中DNA所在的位置区分亲代与子代的DNA 15N/15N 14N/15N 14N/14N 14N/15N 旁栏思考题: DNA复制是以半保留方式进行的 据同位素标记和密度梯度离心实验可知: 细胞中DNA的复制是以亲代的一条链为模板,按照碱基互补配对原则,合成另一条互补碱基的新链,复制出的DNA分子与亲代DNA分子完全相同,其中一条链来自亲代DNA,另一条链是新合成的。 DNA分子连续复制演绎的计算规律 DNA分子数:2n 只含15N分子:0 含14N/15N杂种分子:2 只含14N分子:2n-2 DNA单链总数: 2n+1 含15N的链:2 含14N的链: 2n+1-2 DNA分子连续复制演绎的计算规律 DNA分子复制n次 1、实验室里,让一个DNA分子(称第一代)连续复制三次,问:在第四代DNA分子中,有第一代DNA分子链的DNA分子占( ) A.100% B.75%????????????C.50%????????????? D.25% 解析: 复制三次,共有DNA8个,含有第一代的只有两个,所以是1/4,即25%。 2、将用15N标记的一个DNA分子放在含有14N的培养基中让其复制三次,则含有15N的DNA分子占全部DNA分子的比例和含有15N的DNA单链占全部DNA单链的比例依次是 ( ) A.1/4、1/16 B.1/4、1/8 C.1/2、1/4 D.1/8、1/8 解析: 复制三次后,共有8个DNA分子、16条单链,其中含有15N的DNA分子有2个,含有15N的DNA单链有2条,因此含有15N的DNA分子占全部DNA分子的比例为2/8,含有15N的DNA单链占全部DNA单链的比例为2/16,即1/4和1/8。 3、将大肠杆菌放在含有同位素15N的培养基中培育若干代后,细菌DNA所有氮均为15N,它比14N分子密度大。然后将DNA被15N标记的大肠杆菌再移到含14N的培养基中培养,每隔4小时(相当于分裂繁殖一代的时间)取样一次,测定其不同世代细菌DNA的密度。实验结果DNA复制的密度梯度离心试验如图所示。 (1)中带含有的氮元素是_ ___。 14N、15N (2)如果测定第四代DNA分子密度,含15N标记的DNA分子比例表示为_______。 (3)如果将第一代(全中)DNA链的氢键断裂后再测定密度,它的四条DNA单链在试管中的分布位置应为____ ____。 (4)上述实验表明,子代DNA合成的方式是_____。 解析: 两条DNA单链均标记了15N的DNA为全重DNA,转入到14N培养基中培养;第1代为全中DNA,第2代为1/2中DNA,1/2轻DNA,第4代为2/24中DNA,(24-2)/2轻DNA。 1/8 ?重带、 ?轻带 半保留复制
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