基因工程的基本操作程序上课用.ppt

阅读P8-11，思考下列问题： 本节小结 1、基因表达载体的构成主要包括哪几部分？ 2、为什么要构建基因表达载体？ 3、常见的三种将基因表达载体导入受体细胞的方法。 1、基因工程中科学家常用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是 （ ） A．结构简单、操作方便 B．繁殖速度快 C．遗传物质含量少、简单 D．性状稳定、变异少 B 小试牛刀 2. 采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是( ) ①将毒素蛋白质注射到棉受精卵中 ②将编码毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中 ③将编码毒素蛋白的DNA序列与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵中 ④将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组，导入细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养 A．①② B．②③ C．③④ D．①④ C 1，右图是基因表达载体结构示意图， 请根据基因工程 的有关知识， 回答下列问题： （1）图中A段是______。 抗生素抗性基因可作为______ (2) 构建基因表达载体时需要用到 两种工具酶______ 和______ 。若所使用的是Sma I 酶,其识别的碱基序列和酶切位点为CCC GGG, 则要求使用_____DNA连接酶。 (3) 若要获得转基因抗虫棉，通常要把重组DNA导入土壤农杆菌。抗虫基因能否在棉花 植株体内成功表达的关键是： _______________________。 标记基因 终止子 T4 抗虫基因进入棉花细胞并 插入到棉花细胞的染色体DNA上 限制酶 DNA连接酶 第三课时 目的基因的检测和鉴定 学习目标 1、说出目的基因在分子水平检测的三种方法并理解其检测的原理。 2、说出目的基因在个体生物学水平的鉴定方法。 复习回顾 1）将目的基因导入受体细胞有哪些方法?(试举例说明) 2）简述农杆菌转化法 第四步：目的基因的检测与鉴定 检测 ①导入检测：目的基因是否导入受体细胞 方法—— DNA分子杂交 ②表达检测 转录检测——分子杂交 翻译检测——抗原抗体杂交 分子检测法 鉴定 抗虫鉴定 抗病鉴定 活性鉴定等 个体水平的鉴定 知识延伸——DNA分子杂交技术 该方法是根据碱基互补配对原则，把互补的双链DNA解开，把单股的DNA小片段上用同位素、荧光分子或化学发光催化剂等进行标记，以此作为探针。之后同被检测的DNA序列进行杂交，从而检出所要查明的DNA或基因。 返 回 1、用β-珠蛋白的DNA探针可以检测出的遗传病是 ( ) A．镰刀状细胞贫血症 B．白血病 C．坏血病 D．苯丙酮尿症 A 2、应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是 ( ) A．用于检测疾病的医疗器械 B．用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子 C．合成β-珠蛋白的DNA D．合成苯丙羟化酶的DNA片段 B A 4）有关基因工程的叙述正确的是 （ ） A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 D 3）有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶 A 5）基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 A、人工合成目的基因 B、目的基因的检测和表达 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因与运载体结合 C 6）（多选）人们利用基因工程的方法，用大肠杆菌生产人类胰岛素，这一过程涉及到（ ） A.用适当的酶对胰岛素基因与运载体进行切割并连接 B.把重组后的DNA分子导入受体细菌内进行扩增 C.检测重组DNA分子是否导入受体细菌内并表达出性状 D.筛选出能产生胰岛素的“工程菌” ABCD * 学习目标 1、简述基因工程的四个基本步骤。 2、说出获取目的基因的三种途径。 第一课时 目的基因的获取 1.2基因工程的基本操作程序 一、基因工程的基本操作程序 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 核心 1、目的基因主要是指______________________ 2、获取目的基因的常用方法有哪些？ 3 ﹑