第三章生物材料的预处理和液固分离分析.pptVIP

两种现象： 盐溶：低盐情况，盐离子强度的增高，蛋白质溶解度增大. 盐析：高盐，盐离子强度增加，蛋白质溶解度减小. 2.盐析原理： （1）形成离子对，部分中和了蛋白质的电性，排斥作用减弱而能相互靠拢，聚集起来。 （2）中性盐的亲水性比蛋白质大，使蛋白质脱 去了水化膜，使其沉淀。 3、影响盐析的因素 （1）无机盐的种类 盐析能力：半径小的高价离子在盐析时的作用较强，阴离子的盐析效果比阳离子好，尤其以高价阴离子更为明显。 PO43-＞SO42―＞CH3COO―＞Cl―＞NO3―＞I― NH4+＞K+＞Na+＞Li+ 常用：硫酸铵 （2）溶质（蛋白质等）种类的影响 （3）蛋白质浓度的影响 蛋白质浓度提高，盐用量减少。 （4）温度的影响 在无盐或稀盐溶液中，大多数蛋白质溶解度是随温度 升高而增大的，但在高盐溶液中常相反。 （5）pH的影响 当溶液的pH在蛋白质等电点附近时， 可以分级沉淀蛋白质. 4、盐析操作 （1）盐析用盐的浓度表示 固体粉末、硫酸铵饱和溶液 常用“饱和度”来表征硫酸铵在溶液中的最终浓度，25℃时(NH4)2SO4的饱和浓度为4.1 mol／L,767g/L，定义它为100%饱和度. （2）盐析方法和注意事项 分级盐析法 重复盐