蛋白质组学及研究方法重点.pptVIP

蛋白质组学 proteomics 指应用各种技术手段来研究蛋白质组的一门新兴科学，其目的是从整体的角度分析细胞内动态变化的蛋白质组成成份、表达水平与修饰状态，了解蛋白质之间的相互作用与联系，揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律。 2-DE原理 （二）蛋白质相互作用研究技术 1989年Field 和Song等人在酵母细胞中设计的分析蛋白质相互作用的方法。 以真核细胞转录激活因子的结构和活性特点为基础。 3. 免疫共沉淀耦联质谱技术 原理：以细胞内源性靶蛋白为诱饵，用抗靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行免疫共沉淀（immuno-precipitation，IP）纯化靶蛋白免疫复合物，凝胶电泳分离后，质谱鉴定靶蛋白的结合蛋白。 基本原理：将高度密集排列的蛋白分子作为探针点阵固定在固相支持物上，当与待测蛋白样品反应时，可捕获样品中的靶蛋白，再经检测系统对靶蛋白进行定性和定量分析。 4.荧光共振能量转换（fluorescence resonance energy transfer ,FRET）效应分析 5.激光共聚焦 （三）蛋白质芯片技术（protein chips，protein array） * * * * * * 蛋白质组学及其研究技术 蛋白质组实验室流程 The 1st D: Isoelectric Focusing IEF + – pH 3 pH 7.5 pH 10 + – pH 3